Рск анализ крови что это

Антигены и антитела. Серологические реакции между антигенами и антителами.

Антигены – генетически чужеродные вещества, которые при введении в организм животного или человека вызывают специфический иммунный ответ — синтез антител, формирование сенсибилизированных Т-лимфоцитов, иммунологической  памяти или толерантности. Под чужеродными веществами понимаются химические структуры, которых нет в организме. Инородными для организма человека являются вирусы, микроорганизмы, а также клетки, ткани, органы животных и других людей. Антигены имеют несколько рецепторов для связи с антителами и способны вступать в реакцию с ними как в организме животного или человека (in vivo), так и вне организма – в пробирке (in vitro).

Антитела — высокомолекулярные белки глобулиновой фракции сыворотки крови. Антитела синтезируются под влиянием антигена и способны специфично реагировать (соединяться) с соответствующим антигеном. Все антитела имеют характерную структуру иммуноглобулинов; отличаются по иммунологическим, биологическим и физическим свойствам; и делятся на 5 классов – ІgG , ІgА, ІgМ, ІgD и ІgЕ. 

Особенности данного теста

Проведение данного анализа не всегда способно дать 100%-ную уверенность в том, что определенное заболевание обнаружено. Бывает так, что результаты могут быть неоднозначными и требуется проведение других процедур.

Например, во время исследования на бруцеллез сыворотка крови проходит контроль на самозадержку без антигена. Это существенно повышает достоверность тестирования. Анализ на бруцеллез может иметь положительное или отрицательное значение, а также вызывать сомнения.

При получении сомнительных результатов, не имеющих однозначной трактовки, рекомендовано сдать анализ повторно. Кроме того, бруцеллез можно выявить в результате посевов крови, исследовав костный мозг и спинно-мозговую жидкость.

Реакция флюоресценции

Один из видов серологических реакций флюоресценция или РИФ. Этот метод исследования проводится с использованием реагента, который подсвечивает искомые антитела в сыворотке крови. Для постановки серологической реакции прямого типа или ПИФ специфические антитела помечаются флюоресцирующим веществом. Это самый быстрый тип исследований, который проводится в один этап.

Другой способ, который называется непрямым или РНИФ, проводится в 2 стадии.
первой специфические клетки (антитела) не имеют флюоресцирующих меток, а на второй используются соответствующие меченые антитела для выявления комплекса антиген-антитело. Реакция свечения появляется только после связи со специфическим антителом. Результат манипуляций оценивается специальным прибором, который оценивает интенсивность излучения, а также определяет форму и размер исследуемых объектов. Инфекционный агент определяется с достоверностью 90-95% в зависимости от типа и стадии заболевания.

Проявление вируса Эпштейна-Барра в анализе крови

Вирус Эпштейна-Барра(Epstein-Barr virus, Human Herpes Virus type 4) – это вирус семейства герпесвирусных. Один из самых известных и распространенных вирусов человека. Проявляется вирус Эпштейна-Барра в анализе крови в том случае, когда лимфомы Беркитта прогрессируют в культуре клеток, а также в головном мозге человека. Кроме того, инфекционный мононуклеоз свидетельствует о наличии вируса Эпштейна-Барра в анализе крови.

Инфицироваться вирусом Эпштейна-Барра можно через слюну, реже во время переливания крови и трансплантации костного мозга. Вирус имеет свойство выделяться во внешнюю среду через ротоглотку в течение 18 месяцев после заражения. Зачастую у взрослых при вирусе Эпштейна-Барра в анализе крови обнаруживают антитела, что свидетельствует о хроническом инфицировании.

Как проводится анализ

Забор материала делают из вены. Необходимость в проведении серологического исследования возрастает, если имеется подозрение на инфекции половой системы. Чтобы подтвердить полученные данные, может назначаться дополнительный серологический анализ. Его проводят, чтобы узнать количество антител. Лаборантом в сыворотку крови вводится антиген возбудителя, а затем оценивается реакция. Возможно также определение инфекции по антигенам, тогда осуществляется введение антител для выявления антигенов.

Второй вариант также подходит для получения информации о группе крови. Нормой считается отсутствие антител, такой результат анализов показывает, что инфекции нет. С помощью современной методики врачам удается на начальной стадии узнать о заболевании, постоянно контролировать его развитие, назначить эффективную терапию. Анализ крови дает быстрый и точный результат, больного не нужно готовить к проведению исследования.

Исследование крови выполняется для определения количества антигенов, антител обследуемого пациента. Серологическое обследование определяет количество гормонов, других веществ в полученном материале. В функции иммунной системы входит блокировка инородных тел. При появлении инфекции вырабатываются собственные антитела, задачей которых является выявление возбудителей разных заболеваний, уничтожение их. Это используется в медицине для проведения исследования, постановки правильного диагноза, назначения лечения.

Методы изучения определенных антител

Серологические исследования — это методы изучения определенных антител или антигенов в сыворотке крови больных, основанные на реакциях иммунитета. С их помощью также выявляют антигены микробов или тканей с целью их идентификации.

Обнаружение в сыворотке крови больного антител к возбудителю инфекции или соответствующего антигена позволяет установить причину заболевания.

Серологические исследования применяют также для определения антигенов групп крови, тканевых антигенов и уровня гуморального звена иммунитета.

Серологические исследования включают в себя различные серологические реакции:

1. Реакция агглютинации.
2. Реакция преципитации.
3. Реакция нейтрализации.
4. Реакция с участием комплемента.
5. Реакция с использованием меченых антител или антигенов.

Реакции агглютинации — это простые реакции склеивания корпускулярных антигенов с помощью антител.

Различают:
— прямые реакции агглютинации, которые используют для выявления антител в сыворотке крови больного. Добавление взвеси убитых микробов к сыворотке больного вызывает образование хлопьевидного осадка (положительная реакция склеивания микробов антителами).

Используется для определения брюшного тифа, паратифа и др.

— реакция пассивной, или непрямой гемагглютинации основана на использовании эритроцитов с адсорбированными на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соответствующими антителами сыворотки крови больных приводит к образованию фестончатого осадка.

— реакция коагглютинации — разновидность реакции агглютинации, в которой антигены возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой.

Реакции преципитации — реакции, в которых происходит осаждение комплекса антиген-антитело. Антиген в данном случае должен быть растворимым. Осадок комплекса антиген-антитело называется преципитатом. Реакцию ставят путем наслоения раствора антигена на иммунную сыворотку.

При оптимальном соотношении антиген-антитело на границе этих растворов образуется непрозрачное кольцо преципитата. Диаметр кольца преципитации пропорционален концентрации антигена. Наибольшее распространение получила реакция преципитации в полужидком геле агара (двойная иммуно-иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.).

Реакцию используют для определения содержания в крови иммуноглобулинов различных классов, компонентов системы комплемента.

Реакция нейтрализации основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные клетки или ткани. При отсутствии повреждающего эффекта смеси антител и микробов или их токсинов на культуру клеток говорят о специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.

Иммуноферментный анализ крови

Одним из основных видов серологического исследования является иммуноферментный анализ крови. Он проводится с целью контроля качественного или количественного содержания антигенов и антител в сыворотке крови пациента. Кроме этого данный метод даёт возможность определить количество гормонов, иммунологических комплексов и других биологических веществ в сыворотке.

Как было указано выше, при попадании в органы и ткани антигенов иммунная система блокирует их воздействие на организм с помощью собственных специальных белков – антител или иммуноглобулинов. Под их воздействием происходит образование комплекса антиген – антитело.

Именно его количественный и качественный анализ и является основой иммуноферментного метода.

Основным биологическим материалом этого лабораторного метода является кровь пациента, хотя исследования спинномозговой жидкости, околоплодных вод, лёгочного пунктата тоже представляют большую ценность в диагностике и лечении многих заболеваний.

Иммуноферментный анализ крови как составляющая серологического анализа основной упор делает на исследование иммунных молекул крови или иммуноглобулинов. Их специфическая особенность обнаруживать и уничтожать определённые возбудители инфекционных болезней, кооперируясь с конкретным антигеном, широко используется для проведения данного исследования.

Из известных в медицинском мире пяти типов иммуноглобулинов широкий клинический эффект получил контроль за наличием в сыворотке крови иммуноглобулинов A, M, и G. Особенно важен иммуноглобулин A, который за счёт своего присутствия на поверхности слизистых оболочек препятствует проникновению чужеродного агента в организм

Важно и то, что возможность определения типа иммуноглобулина при этом исследовании позволяет не только ставить правильный диагноз, но и прогнозировать течение болезни с большим процентом вероятности

Необходимость исследования

Данный метод обследования человека распространено, которое используется по всему миру. Для выявления в сыворотке крови различных идиопатических клеток, которые возникают в теле человека, из-за проникновения вирусов и инфекции. Исследование изосерологического характера применяется для определения у человека резуса, группы, а также иные показатели крови.

Чаще всего серологический анализ крови применяется в гинекологии. Это дает возможность диагностировать различные заболевания, которые путем полового контакта передаются. Также данный метод используется для комбинированного исследования женщин, которые скоро будут рожать. Это необходимо для исключения таких заболеваний, как:

1. Сифилис.
2. Вирус иммунодефицита.
3. Токсоплазмоз.

Серологические анализы обязательны, если будущая мать становится на учет. Если ребенок заболевает корью, краснухой, ветряной оспой, и другими инфекционными заболеваниями, то серологический метод используется для полного подтверждения диагноза. Показано данный метод, если клинические проявления не совсем ярко выражены, либо по каким-либо иным причинам диагностики.

Очень часто назначается это анализ врачами-венерологами. Метод без малейших изъянов устанавливает диагноз, или решает вопрос, человек болен или нет. Диагностируются антитела среди таких болезней, как: герпес, сифилис, уреаплазмоз, лямблиоз, хламидиоз и другие подобного характера патологии. Эффективность наблюдается также при выявлении гепатита вирусного характера, аллергические проявления, энцефалит, коклюш, дифтерия, бруцеллез. Назначает этот специфический анализ врач-терапевт.

Что такое серологические исследования

Важнейшую нишу занимает серологические реакции, которые решают госпитализировать человека в отделение, или нет.

Исследование с точностью определяет, на каком этапе развития находится какой-либо патологический процесс, а также указывает эффективность уже назначенного лечения.

Чтобы провести серологическую диагностику можно использовать различные материалы биологического характера. Это может быть как слюна больного, так и кал. Но в большинстве берется кровь человека из вены. Проводится забор крови исключительно в условиях лаборатории. Обязательным для пациента является рекомендация врача для проведения этой манипуляции.

Анализ крови на вирус герпеса

Данный вид анализа проводится для определения вируса простого герпеса в крови человека. Заболевание протекает в виде маленьких болезнетворных язв, которые напоминают волдыри. Они появляются на коже и слизистой оболочке (поверхность носа, горла, рта, мочеиспускательного канала, прямой кишки, влагалища). Герпес может возникать в виде единичных высыпаний, но в большинстве случаев у человека проявляется несколько вспышек. Выделено два типа простого вируса герпеса:

• вирус простого герпеса-1 – это герпетическая лихорадка, которая проявляется на губах. Передается через поцелуи и совместное использование столовых приборов (ложки, вилки, чашки). При данном виде герпеса язвочки могут высыпать и на половых органах человека;
• вирус простого герпеса-2 – это генитальный герпес (к примеру, во влагалище или вокруг него). Данный вид инфекции может появиться у малышей, которые рождены естественным образом женщинами с положительным результатом диагностики крови на вирус герпеса. В большинстве случаев такой вид герпеса передается половым путем.

Показания к анализу

Анализ крови на вирус герпеса проводится только при инфекции гениталий. Для исследования обычно используют кровь, а также жидкость спинного мозга, мочу или слезы. При этом анализепроисходит выявление антител, которые вырабатываются иммунной системой для борьбы с заболеванием. Данный вид исследования проводится редко, так как результаты не всегда бывают точными. Кроме того, при анализе нельзя установить форму проявления заболевания (первичное или хроническое инфицирование). Для такого процесса требуется время на выработку антител после первого инфицирования, а у человека может не проявиться положительный результат при исследовании. По некоторым анализам крови на вирус герпеса можно определить тип заболевания (вирус простого герпеса-1 или вирус простого герпеса-2).

Считается, что инфекция герпеса неизлечима. Вирус постоянно присутствует в организме человека после заболевания. Он остается в определенных типах нервных клеток и вызывает образование множественных язв, а также высыпаний. Повторное инфицирование проявляется в случае пережитого стресса, переутомления, воздействия солнечного света или других инфекций, к примеру, простуды или гриппа.

Анализ крови на вирус герпеса проводят для того, чтобы выяснить:

• действительно ли вирус простого герпеса вызывает сыпь вокруг рта или области гениталий;
• какой тип вируса (вирус простого герпеса-1 или вирус простого герпеса-2) вызывает сыпь вокруг рта или области гениталий;
• передалась ли инфекция партнеру пациента с генитальным герпесом;
• есть ли инфекция у малыша, рожденного от матери с заболеванием генитального герпеса.

Результаты различных анализов на вирус герпеса получают через разные промежутки времени. Например, заключение экспресс-метода вирусной культуры можно узнать через два-три дня. Результаты стандартного метода можно получить в течение 14 дней. Результаты анализа на антигены готовы через день.

Плюсы серологического анализа крови

Диагностические методики с использованием серологических реакций обширно используются в современной медицинской практике. Особенно часто это делается при определении вирусных и инфекционных патологий.

Эти же анализы применяются при проведении географического скрининга и медицинского обследования с целью предупреждения эпидемиологического распространения инфекции.

К достоинствам метода можно отнести:

• Высокий уровень достоверности.
• Быстрое проведение реакции и получение результатов. Результаты РСК известны уже через 24 часа. При особой ситуации, в условиях стационара, анализ будет готов через несколько часов.
• Осуществление контроля развития болезни и эффективности проводимой терапии.
• Невысокая стоимость и доступность для пациентов.

Как нужно подготовиться

Проведения серологического исследования проводится как в поликлинических условиях, так и в частных лабораториях. Рекомендуется сдавать этот анализ в том месте, где самое новое оборудование. Также рекомендовано прислушиваться отзывов от людей, которые уже сдавали свои анализы. За отдельную плату, забор биологического материала можно произвести в домашних условиях, в результате исключительных обстоятельств.

Существует несколько правил, которые надо учитывать, перед тем как сдавать кровь из вены. Ни в коем случае нельзя кушать, перед сдачей анализа. Исключительно на голодный желудок. Человек должен быть в полном спокойствие. За несколько дней до сдачи материала, исключается прохождения иных методов исследования (рентген, узи, кт, мрт). Также нужно после разрешения доктора отменить препараты, которые принимались изначально, для взятия анализа. Что касается других правил, которые нужно соблюдать, они назначаются врачом. Ведь для каждого недуга есть свои запреты. Например, если у человека подозревают гепатит, то за несколько дней нужно исключить прием жирной пищи и спиртных напитков.

РИФ (реакция флюоресценции)

Существует несколько подвидов серологического метода. Одним из них является реакция флюоресценции. Довольно неплохой и достаточно информативный метод. Применяется реагент, который сразу показывает антитела в исследуемой крови. Заметны эти антитела благодаря подсвечиванию. Данная реакция является самой быстрой, из всех методов исследования.

Серологические реакции

Также есть еще способ, он называется РНИФ. Его проводят в два этапа. Сначала применяются метки, которые не являются флюоресцирующими. После применяют меченые антитела для нахождения комплекса. Свечения наблюдается только тогда, когда происходит связь антиген-антитело. Что наблюдать этот процесс, ученые используют специальный прибор, который выявляет размеры и строение. Информативность данного способа достигает 96%.

ИФА (иммуноферментный анализ)

Используются специальные реагенты, которые необходимы для проведения иммуноферментного анализа. Специфические реагенты прикрепляются к искомому антителу. Вследствие этого этот метод дает возможность точно определить и подсчитать искомые комплексы. Если никаких маркеров нет, то реакция прошла отрицательно.

Данный серологический метод дает возможность объективно подсчитать искомые клетки. Тем самым диагностируется заболевание, которое может находиться в стадии разгара, или же переходить в стадию хронического течения. Также для комплексной постановки диагноза необходимо учитывать также клинические проявления.

Серологические реакции

В лабораторной практике используют серологические реакции — лабораторные реакции между антигенами и антителами, которые приводят к регистрируемым изменениям в исследуемой системе. Эти реакции получили название серологических, так как для их постановки используют сыворотку (serum), содержащую антитела.

Серологические исследования, выполняемые для обнаружения специфических антител и антигена возбудителя при инфекционных заболеваниях, — более доступные методы лабораторной диагностики, чем бактериологическое выявление возбудителя. В ряде случаев серологические исследования остаются единственным методом диагностики инфекционных заболеваний.

Источник: obsleduem.net

Что такое серологический анализ

Серологические реакции являются важным инструментом для выявления причины инфекционного заболевания. Серодиагностика — специфический анализ крови, который основан на взаимодействии антигенов и антител в сыворотке.

Антитела представляют собой белковые молекулы, образующиеся в организме человека через несколько дней после контакта с патогеном. Они являются строго специфичными для каждой инфекции и вырабатываются для уничтожения возбудителя. Распознавание этих белковых фракций позволяет быстро выявить и микроорганизм, к которому они образовались. Антигены же представляют собой чужеродные белки, содержащиеся в бактериях. Синтезированное антитело находит в крови антиген и прочно связывается с ним, не позволяя ему губительно влиять на организм.

Реакция связывания этих двух белков с образованием единого комплекса лежит в основе применения всех серологических реакций. Для поиска антител используются особые стандартные растворы с антигенами возбудителей (диагностикумы), которые добавляют к исследуемой крови. Серодиагностика определяет все белковые маркеры инфекций, а последующая расшифровка результатов дает информацию еще и о продолжительности заболевания. Эта особенность характерна только для серологического анализа, что делает его методом выбора во многих клинических ситуациях.

Преимущества и недостатки

Серологический метод лабораторной диагностики имеет большое количество плюсов, что глубоко внедрило его в практическое использование во всех отраслях медицины: гинекологию, урологию, инфектологию и венерологию.

Серодиагностика является общедоступным анализом, позволяющим быстро получить точные результаты. Она не требует длительной подготовки к забору материала и легко переносится всеми пациентами. Для забора венозной крови от пациента требуется соблюдать диету лишь в течение 48 часов. Серологические реакции также обладают высокой специфичностью (100%), чувствительностью (95%) и точностью (90-95%).

Но этот анализ венозной крови требует больших затрат дорогих диагностикумов, что влияет и на его себестоимость. Некоторые возбудители обладают слабой иммуногенностью, то есть в организме к ним вырабатывается мало антител, поэтому проведение серодиагностики невозможно. Кроме того, метод значительно реже используется при вирусных инфекционных патологиях, уступая по эффективности ПЦР-анализу.

В каких случаях назначают

Серологическое лабораторное исследование крови назначают для диагностики инфекционных заболеваний: бактериальных, вирусных, протозойных, паразитарных и микст-инфекций. Наиболее широко выявление антител используется в акушерско-гинекологической и урологической практике. В урологии это лабораторное исследование используется при уретритах неясной этиологии, баланитах и баланопоститах. В гинекологии направляют на обследование при любом воспалительном процессе репродуктивной системы (вульвовагиниты, кольпиты, цервициты и эндометриты).

В акушерстве каждой беременной женщине назначают анализ венозной крови с целью исключения заболеваний, опасных для плода. Эти инфекции носят название «TORCH-комплекс» и определяются с помощью серологических реакций. ТОРЧ-инфекции вызывают у развивающегося плода пороки развития, часто несовместимые с жизнью. Именно поэтому ранняя и точная диагностика этих инфекций является основной целью акушера-гинеколога. Серология проводится и при подозрении на мужское или женское бесплодие по причине инфекционной патологии.

Если врач подозревает у пациента наличие инфекции, передающейся половым путем, то требуется прохождение комплексного обследования, включающего серодиагностику. Если у одного из партнеров найдено заболевание из группы ИППП, то второму партнеру необходимо пройти исследование, даже если у него нет клинических симптомов.

Методы диагностики

Серологические реакции включают в себя несколько разновидностей. Все они основаны на поиске антител (иммуноглобулинов) и антигенов, но проводятся разными способами и имеют разные диагностические критерии постановки диагноза. Серологические методы лабораторного исследования в зависимости от методики проведения делятся на простые и сложные. Классификация основана на том, сколько белков необходимо найти: простые реакции определяют только антитела или антигены, а сложные — комплексы «антиген + иммуноглобулин». Сложный метод исследования более предпочтителен, потому что чувствительность анализа значительно выше.

Чаще всего в лабораториях серологическая диагностика представлена следующими иммунохимическими серореакциями:

• реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
• иммуноферментный анализ (ИФА);
• реакция непрямой гемагглютинации (РНГА);
• реакция связывания комплемента (РСК).

Эти виды исследования относятся к сложным серореакциям и обладают значительными преимуществами перед остальными. Они проводятся крайне быстро, имеют высокую точность диагностики болезней и не требуют длительной подготовки: от пациента требуется только сдать анализ венозной крови.

Иммунофлюоресцентная реакция РИФ

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), или анализ Кунса – метод экспресс-обнаружения антигенов патогенного агента в биоматериале пациента. Для проведения РИФ используется специальный краситель – флюорохром, способный светиться под люминесцентным микробиологическим микроскопом. Флюорохром добавляют в диагностическую сыворотку со строгим соблюдением концентрации, иначе реакция может показать ложные результаты. Иммунофлюоресцентная реакция бывает двух видов: прямая и непрямая.

Прямая реакция Кунса выявляет только антигены возбудителя. Для их определения в биоматериал добавляют диагностическую сыворотку, состоящую из антител и флюорохрома. Антигены, находящиеся на клеточной стенке возбудителя, связываются с окрашенными антителами. Врач лабораторной реакции рассматривает предметное стекло под микроскопом и видит ярко-зеленое свечение. Типичным примером такой реакции является выявление хламидий, контрастированных синькой Эванса.

Непрямая РИФ (РНИФ) определяет антигенно-антительные комплексы. Для этого врач последовательно добавляет в образец сначала немеченые иммуноглобулины, чтобы они связались с антигенами. Затем к образованным иммунным комплексам добавляется новая сыворотка, содержащая уже меченные красителем антитела к недавно образовавшимся комплексам. Наиболее часто прямая реакция используется для диагностики вирусных болезней.

Единственным недостатком данных реакций является некоторая степень субъективизма при учете результатов: одна и та же интенсивность свечения иногда расценивается врачами по-разному, что в итоге приводит к ложным данным лабораторного обследования.

Реакция непрямой гемагглютинации РНГА

РНГА — анализ, направленный на выявление иммуноглобулинов или антигенов в различных биологических жидкостях. Реакция непрямой гемагглютинации является одним из самых точных методов для определения титра иммуноглобулинов, что позволяет судить о стадии инфекционного процесса. Нарастание титра иммуноглобулинов в 4 раза в двух анализах крови, взятых с промежутком в несколько недель, говорит об остром инфекционном процессе бактериальной или вирусной этиологии. РНГА дает возможность лечащему врачу назначить правильную медикаментозную терапию с учетом стадии заболевания. Широкое распространение исследование получило для выявления ИППП, менингококковой инфекции, ботулинический токсина (ботулотоксина) и большинства вирусных инфекций.

Для проведения исследования используются красные клетки крови – эритроциты, на поверхности которых расположены антигены или антитела. Сыворотка носит название антигенного или антительного эритроцитарного диагностикума. Диагностикум добавляют к исследуемой крови, затем наблюдают за реакцией. При присоединении этих эритроцитов к антигенам или иммуноглобулином крови образуются комплексы, а красные кровяные клетки начинают выпадать в осадок. При отрицательном анализе эритроциты скапливаются в виде небольшого пятна в виде пуговицы. Если же на дне пробирки или планшетки образовался осадок с фестончатыми краями в виде зонтика, то реакция считается положительной.

Сложность в проведении этого серологического теста заключается в необходимости точного приготовления эритроцитарного диагностикума и строгого соблюдения концентраций используемых компонентов.

Иммуноферментный анализ ИФА

Метод иммуноферментного анализа считается самой точной, специфичной и чувствительной серореакцией. Учет результатов ИФА автоматизирован, а человеческий фактор и субъективная оценка данных исключена. Точность результата достигает 98%, а при повторном исследовании – 100%. ИФА используется для диагностики инфекций, передающихся половым путем, ВИЧ, вирусных гепатитов A, B, C, D, E, TORCH-инфекций и множества других заболеваний.

Существует более десяти модификаций данного анализа (прямой, непрямой, неконкурентный, твердофазный и т. д.), но все они имеют особые, характерные особенности диагностики, но схожий принцип проведения. Фазы иммуноферментных серологических реакций включают в себя создание комплекса антиген-антитело, к которому добавляют ферменты, играющие роль метки. Затем исследуемый материал располагают на специальный планшет, помещают в автоматизированную систему и начинают поиск комплексов, меченых радионуклидами. Анализатор выявляет святящиеся метки, измеряет оптическую плотность и степень свечения иммунных клеток, а затем выдает результат анализа.

Как подготовиться к сдаче

Анализ не требует особой подготовки, все правила соответствуют обычной сдаче венозной крови.

От пациента требуется строго соблюдать ряд простых правил:

• за 72 часа до манипуляции следует соблюдать диету: нельзя употреблять в пищу жирное, жареное, соленое и острое, алкогольные напитки также запрещены;
• рекомендуется поддерживать оптимальный водный баланс в организме, а для этого необходимо пить не менее двух литров чистой питьевой воды;
• анализ венозной крови проводится на голодный желудок, поэтому минимум за 10 часов до манипуляции нельзя есть, пить чай, кофе и другие напитки;
• за 4 часа до процедуры запрещается курить.

Если по состоянию здоровья пациент обязан пить какие-либо таблетки, необходимо заранее предупредить об этом лечащего врача. За час до сдачи материала рекомендуется избегать физических нагрузок, а перед тем, как зайти в процедурный кабинет, следует присесть и отдохнуть 10-15 минут.

Процесс сдачи анализа

Забор венозной крови на серологическое исследование осуществляется в первой половине дня. Пациенту следует заблаговременно приехать в лабораторию, взяв с собой необходимые документы (паспорт и направление на анализ).

Пациенту предлагают пройти в процедурный кабинет и удобно расположиться на кресле. Взятие крови осуществляют из вены, которая находится в области локтевого сгиба, поэтому необходимо освободить предплечье и локтевую зону от вещей. На плечо накладывается жгут, а под руку подкладывают подушку. Медицинская сестра надевает одноразовые стерильные перчатки и обрабатывает место пункции ватным тампоном, смоченным в дезинфицирующем средстве.

Алгоритм проведения венозной инъекции включает в себя нагнетание крови в вену, для этого пациента просят несколько раз сжать и разжать кулак. Сосуд при этом лучше визуализируется и прощупывается, что облегчает забор материала. Затем медсестра вводит иглу шприца в вену, берет 10 миллилитров крови и наклеивает на место инъекции бактерицидный пластырь. Чтобы избежать образование гематомы, после манипуляции следует согнуть руку в локте на 15-20 минут.

Расшифровка результатов

Для правильной постановки диагноза серологические реакции должны расшифровываться квалифицированным специалистом. Выявление антител еще не говорит о наличии заболевания, в некоторых случаях циркуляция иммуноглобулинов в крови — это норма. Так, в нашем организме постоянно присутствуют антитела IgM от кори, ветряной оспы и т.д. Они являются маркером перенесенной инфекции и защищают нас от повторного инфицирования. Поэтому учет результатов анализа крови и расшифровка серологического исследования должны проводиться индивидуально для каждого пациента.

Однако существуют определенные серологические маркеры инфекционных заболеваний:

• Выявление в крови иммуноглобулинов класса A к вирусу или бактерии свидетельствует об остром инфекционном процессе, длящемся не более 14-ти дней.
• Если в крови найдены иммуноглобулины класса M, то требуется расширенная лабораторная диагностика, потому что эти антитела – маркер как уже перенесенной болезни, так и длительного инфицирования.
• Нарастание титра антител в 4 и более раз в двух последовательно взятых анализах крови говорит о наличии инфекционного заболевания.
• Выявление любых антигенов патогена свидетельствует о том, что возбудитель присутствует в организме.

В случае неясной диагностической картины проводятся повторные серологические тесты или обследование дополняется другими методами исследования (ПЦР, бакпосев и т.д.)

Источник: ozppp.com

Особенности реакции Вассермана

Что это за анализ, объясняется с точки зрения иммунологии. Исследование проводится методом РСК – реакции связывания комплемента. Комплемент представляет собой группу специфических белков, которые участвуют в сложном каскаде иммунных реакции. Они являются частью врожденного и приобретенного иммунитета. Система комплемента неактивна до тех пор, пока ее не активирует чужеродный белок, вырабатываемый внедрившимися микроорганизмами.

Классический путь активации происходит после контакта с бактерией. На поверхности имеются собственные белки-антигены. Для человеческого организма они чужеродны, в ответ происходит выработка белков-антител. Комплемент необходим для стимуляции антител, а после образования комплекса с антигенами микроорганизм становится видимым для иммунных клеток-макрофагов. Они поглощают бактерии и способствуют выздоровлению.

При заражении бледной трепонемой, возбудителем сифилиса, в организме формируются антитела, которые сохраняются долгое время. По их концентрации можно определить фазу болезни, что и показывает RWанализ крови.

Для анализа Вассермана необходимы 5 компонентов:

• диагностируемый антиген;
• диагностические антитела;
• индикаторный антиген – эритроциты барана;
• индикаторные антитела – кроличьи гемолизины;
• комплемент.

Во время постановки реакции необходимы 2 системы антиген-антитело, одна из них – индикаторная, а вторая – специфическая. В норме взаимодействие антигена и антитела сопровождается связыванием комплемента, при этом формируется комплекс, который зрительно не заметен. Поэтому необходима индикаторная гемолитическая система. Сыворотка сенсибилизирует эритроциты, делает их чувствительными к действию комплемента. Поэтому в его присутствии происходит гемолиз – распад красных кровяных клеток, раствор окрашивается.

Расшифровка результатов RW анализа крови строится на основе выраженности гемолиза. Если раствор сохранил исходное прозрачное состояние, значит, весь комплемент связался со специфической системой. Это показатель появления комплексов антиген-антитело, что говорит о том, что в сыворотке крови есть антигены сифилиса, а к ним в организме выработались антитела. Такой результат положительный.

При отсутствии в крови специфических антител к антигену, не формируются их комплексы, а комплемент не активируется и остается свободным. Он связывается с индикаторными белками, вызывает гемолиз эритроцитов и смесь в пробирке окрашивается в красный цвет, что означает RW анализ крови отрицательный.

RW анализ крови проводится в лабораторных условиях при соблюдении стерильности. Используемые биологические материалы и кровь пациента проходят тщательную подготовку, их титруют в различных соотношениях с комплементом, добавляя от 0,5 до 0,05 мл этого белка. По интенсивности реакции в каждой пробирке судят о результатах реакции.

Кому рекомендуется исследование

Сифилис – это опасное инфекционное заболевание, которое передается половым путем. После заражения первые симптомы часто остаются незамеченными. В местах проникновения возбудителя появляются язвочки. У женщин они могут появляться во влагалище, на шейке матки, в области прямой кишки или во рту. Они не сопровождаются неприятными ощущениями, болезненностью или специфическими выделениями.

Если возбудитель оказался на коже паховой области, половых губ или промежности, то в этих же местах локализуются сифиломы. Язвы не сопровождаются зудом, не шелушатся и проходят самостоятельно бесследно. На их месте не формируется рубец или пигментация. Поэтому люди не обращаются к врачу.

Поэтому законодательно введен обязательный экспресс-анализ крови на RW, который проводят в следующих ситуациях:

• всем беременным при постановке на учет, а также незадолго до родов;
• перед любыми инвазивными процедурами, хирургическими операциями, в том числе малоинвазивными;
• во время обязательного профосмотра при трудоустройстве, а также ежегодных обследований.

У беременных обследование может проводиться дополнительно в середине срока вынашивания,  что связано с особенностями образования антител. Если женщина заразилась трепонемой незадолго до беременности или в начальном сроке, иммунитет не успеет среагировать, анализ будет отрицательным.

Врач-гинеколог направит на RW, если у женщины на осмотре обнаружится безболезненная язва на половых органах, увеличенные паховые лимфоузлы. На исследование направит врач-дерматолог или терапевт пациентов, которые обращаются с жалобами на увеличение лимфоузлов и язвы на половых органов, а также появление бледной сыпи по телу. Самостоятельно пройти обследование рекомендуется при случайных половых связях, но не ранее, чем через 3-4 недели после предполагаемого заражения. Это связано с особенностями иммунного ответа и инкубационного периода трепонемы.

Особенности течения сифилиса и образования антител

Сифилис относится к инфекциям, передающимся половым путем, заражение происходит при контакте выделений из половых путей больного человека и здорового. Для внедрения трепонемы достаточно ее попадания на кожу, поэтому первичные элементы часто появляются вокруг анального отверстия, на слизистой оболочке рта и в других местах, где происходило соприкосновение.

Инкубационный период может длиться от недели до 190 дней и зависит от индивидуальных особенностей иммунной системы. Он укорачивается у женщин, которые заразились одновременно из двух источников, но может увеличиваться, если на этапе размножения возбудителей проходило лечение антибиотиками другого инфекционного заболевания.

С момента появления твердого шанкра начинается первичный сифилис. В среднем он длится 6-7 недель и делится на 2 периода:

• серонегативный – анализ крови на RW, выполняемый микрометодом, и другие типы реакции будут отрицательны;
• серопозитивный – реакция Вассермана становится положительной, возникает через 3-4 недели после появления твердого шанкра.

Поэтому при обследовании пациентов с предположительным первичным сифилисом, или твердым шанкром, отрицательный RW – повод повторить анализ через несколько недель. Ретроспективно можно установить давность заражения, отследить половые контакты или обнаружить полового партнера, который стал источником инфекции.

Разделение на серонегативный и серопозитивный периоды в настоящее время используется редко, т. к. появились современные методы диагностики, при которых возбудителя, его ДНК или антитела можно обнаружить уже через несколько недель после заражения.

Вторичный сифилис развивается через 6-7 недель после первичного. Возбудитель гематогенно распространяется по организму, поражает внутренние органы, а на коже появляется сыпь. Это период делят на три других:

• ранний, или свежий – первичное высыпание на коже, в организме уже выработаны антитела;
• рецидивный – высыпания появились повторно из-за ослабления иммунной защиты;
• латентный – болезнь переходит в скрытую форму, которая внешне не проявляется.

Третичный сифилис развивается через много лет существования болезни без лечения. В настоящее время из-за широкого распространения антибиотиков и всеобщей диагностики встречается очень редко. Для него характерно поражение нервной системы, костей, хрящей, внутренних органов.

Образование антител происходит поэтапно. На раннем этапе болезни появляются IgA, после появления твердого шанкра обнаруживаются IgМ, и еще через некоторое время IgG. Особенность течения болезни в том, что при третичном сифилисе иммунный ответ становится очень слабым и антитела могут не определяться при анализе RW.

Как подготовиться к исследованию и что влияет на точность анализа

Перед тем, как сдавать анализ, необходимо получить направление от врача. Исследование не проводится анонимно, т. к. сифилис относится к заболеваниям, которые требуют обязательного установления половых контактов и лечения сексуальных партнеров. Это сдерживающая мера, направленная на остановку распространения болезни.

Специальная подготовка к анализу не требуется. Для обнаружения антител не имеет значение, натощак или нет берут кровь, но врачи рекомендуют утром не принимать пищу, а вечером отказаться от алкоголя и жирной еды. Это стимулирует работу печени, выброс желчи в просвет кишечника и увеличение уровня липидов в крови. При попытке получить сыворотку обнаружится хилез, который не позволит провести анализ.

При беременности женщине также не рекомендуется принимать пищу, но разрешается выпить воды. Если состояние голода плохо переносится, необходимо взять в поликлинику конфету или шоколад, чтобы съесть сразу после сдачи крови.

Забор биологического материала

Для классического анализа RW требуется сдать венозную кровь. Чаще всего ее берут из локтевого сгиба, но допускаются и другие доступные сосуды. Вена, откуда берут кровь, предварительно пережимается жгутом выше места прокола. Пациента просят сжимать и разжимать кулак, чтобы усилить приток крови из артерий. Лаборант обработает кожу раствором антисептика и наберет в стерильный шприц 5-10 мл крови.

Для дальнейшего исследования из крови получают сыворотку, это нужно сделать в кратчайшие сроки, чтобы не произошла активация фибриногена и свертывание. Поэтому форменные элементы осаждаются, а после добавления ионов кальция фибриноген становится неактивным. Антитела при этом никуда не исчезают, поэтому биологический материал пригоден для анализа.

Результаты реакции Вассермана

Срок проведения анализа RW около суток. Современные методы исследования, которые постепенно заменяют реакцию Вассермана по времени готовности приблизительно одинаковы. Но другие методы исследования дают точный результат уже на раннем этапе появления антител или позволяют выявить ДНК возбудителя, поэтому кровь на RW берут реже.

При плановом обследовании перед операцией необходимо учитывать, сколько действителен анализ крови на RW, чтобы в день госпитализации не пришлось проводить повторное обследование и ждать его результатов. Срок действия анализа 2 месяца, как и обследования на ВИЧ и гепатиты. Но в случаях, когда анализ сдается при предоперационной подготовке, врачи рекомендуют сдавать его за месяц до предполагаемой даты операции или манипуляции, чтобы при положительном результате можно было пройти лечение и повторное исследование.

Положительный результат

Сколько делается анализ крови на RW, зависит от особенностей лаборатории, но чаще всего результат готов на следующий день. Исследование направлено на определение суммарных иммуноглобулинов класса M и G, только в этом случае получается положительный результат. Но в заключении можно обнаружить различные значения, которые определяют количеством знаков «+» в количестве от 1 до 4. Чем больше плюсов, тем сильнее реакция Вассермана, тем больше антител у больного.

В кожно-венерологическом диспансере, куда нужно обращаться при положительном результате, назначат дополнительные исследования, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз. Поэтому при получении положительного ответа при первичном исследовании,  не стоит паниковать, это еще не означает болезнь.

Положительный анализ на RW появляется в следующих состояниях:

• при свежем сифилисе, или в первичный серопозитивный период;
• при вторичном серопозитивном сифилисе, если заражение произошло больше 3 месяцев назад;
• при третичном сифилисе в серопозитивный период;
• если с момента лечения прошло меньше года;
• при серорезистентности после лечения болезни.

Анализ крови на RW применяют не только для диагностики сифилиса, но и антифосфолипидного синдрома. Это заболевание, которое чаще возникает у женщин и характеризуется образованием антител к фосфолипидам. Они атакуют эмбрион, что приводит к привычному невынашиванию беременности и самопроизвольным выкидышам в раннем сроке. Но кровь на RW можно сдавать для диагностики антифосфолипидного синдрома, если подтверждено отсутствие сифилиса.

Отрицательный результат

В бланке ответа лаборатории может быть указано, что результат отрицательный, что означает отсутствие антител. Но, учитывая особенности патогенеза болезни и этапы формирования антител, такое заключение не всегда показатель здоровья.

Если сдавать анализ в первые 3-4 недели после полового контакта, во время которого могло произойти заражение, в организме есть только иммуноглобулины класса А, которые не определяются во время анализа на RW. В раннем серонегативном периоде, когда уже есть первые симптомы болезни, также отсутствует полный набор антител, необходимый для положительного результата. Поэтому пациентам с подозрением на сифилис, но отрицательным результатом исследования назначаются дополнительные тесты или повторное обследование через несколько недель.

Отрицательный результат может быть в случае, когда у человека развился третичная стадия патологии. В этом случае имеются выраженные характерные признаки поражения:

• нервной системы;
• аорты и других крупных сосудов;
• спинного мозга;
• костей и мышц;
• слизистых оболочек;
• эпидермиса.

У таких пациентов страдает память, внимание и мышление. Диагностика третичного сифилиса по результатам анализов затруднена.

Ложный результат

У взрослых анализ RW, который дал положительный результат, не всегда говорит об инфекции. Существует понятие ложноположительного исследования, которое связано с особенностью перекрестного реагирования антител. Ложный RW может наблюдаться в следующих состояниях:

• при беременности;
• у больных сахарным диабетом;
• при туберкулезе;
• у больных раковыми заболеваниями;
• у страдающих хроническим алкоголизмом;
• при инфекционном мононуклеозе;
• поражении печени вирусными гепатитами;
• при пневмонии;
• у больных аутоиммунными заболеваниями;
• у наркоманов;
• при подагре;
• после заражения энтеровирусом;
• после недавней вакцинации.

Эти состояния или заболевания характеризуются напряжением иммунной системы, формированием большого количество антител, которые способны прореагировать с комплементом при анализе RW. Поэтому пациентам с ложноположительным результатом необходимы дополнительные обследования. У беременных при получении положительного RW проводят тестирование другим способом. Иногда ложноположительный результат получают при инфицировании другими типами трепонем, которые не относятся к возбудителям сифилиса.

Альтернативные методики исследования

Реакция Вассермана читается устаревшим методом исследования, поэтому используется редко. На смену ей пришли другие, более точные способы, их условно называют анализ RW 2, или экспресс-метод. В некоторых клиниках в бланках продолжают называть исследование на сифилис RW, вне зависимости от типа используемой реакции.

Все методы обнаружения сифилитической инфекции разделяют на прямые, которые позволяют обнаружить бледную трепонему, и непрямые, основаны не поиске антител к возбудителю. На ранних этапах, когда у человека имеется изъязвленный твердый шанкр или высыпания на коже, получить образец можно из патологических очагов. Исследование можно провести тремя способами:

1. ПЦР – метод позволяет обнаружить ДНК возбудителя, а при применении ПЦР в режиме реального времени, отражается количество микроорганизмов. Но для постановки диагноза достаточно получить подтверждение присутствия микроорганизма. Исследование неэффективно при третичном сифилисе.
2. Темнопольная микроскопия – направлена на обнаружение живых трепонем в исследуемом материале. Лаборант может увидеть характерную по форме спиральную микробную клетку, которая совершает поступательные движения, достоверность способа 100%, но результат не получится, если в материале присутствует кровь, гной или в очаге выраженное воспаление.
3. RIT-тест – биологическая дорогостоящая проба, для проведения которой материалом от больного человека заражают лабораторных животных, результат исследования ждать несколько недель, поэтому исследование не используется для раннего скрининга.

По приказу Министерства здравоохранения Российской Федерации для диагностики сифилиса необходимо использовать следующие методы:

1. Микрореакция преципитации – наиболее простой и быстрый способ исследования, который заключается в образовании иммунных комплексов с антителами в крови пациента, они выпадают в осадок в виде белых хлопьев.
2. РПГА – реакция прямой гемагглютинации, норма чувствительности метода 100%, но при воспалительных заболеваниях может быть ложный результат.
3. РИФ – иммунофлуоресценция, проводится с мечеными антителами, на практике применяется редко из-за высокой стоимости.
4. РИБТ – иммобилизация бледных трепонем, дорогостоящее исследование, используется в редких случаях.
5. ИФА – иммуноферментный анализ, незатратный и высоко специфический способ диагностики, иногда дает ложные результаты, в таком случае поводится повторное исследование.

В обязательный перечень не входит реакция иммуноблотинга. Метод диагностики применяется в сомнительных случаях, когда требуется углубленное исследование. Для получения результата требуется серия продолжительных реакций, поэтому анализ готовится около 7 дней.

Исследование крови при помощи RW позволяет диагностировать сифилис и начать лечение, для которого применяется пенициллин. Этот способ обследования постепенно приобретает исторический характер, а на его место приходят современные и быстрые экспресс-тесты.

Читайте также: Анализы на сифилис

Источник: ginekolog-i-ya.ru

Источник: geolaser29.ru

Реакция связывания комплемента (РСК) — это анализ, основанный на способности комплексов антиген-антитело связываться с комплементом. Реагент для этого способа диагностики содержит эритроциты барана. Комплемент — это группа белков, обеспечивающих иммунные реакции в организме. Система комплемента является одним из звеньев иммунной системы человека. Белки системы комплемента подготавливают болезнетворные микроорганизмы к уничтожению — поглощению макрофагами.
Реакцию связывания комплемента проводят для качественного и количественного определения комплементсвязывающих антигенов и антител. Сначала выявляют наличие антигенов или антител в сыворотке крови пациента с помощью стандартных сывороток с антителами или эритроцитарного диагностикума с антигенами. Затем к ним добавляют комплемент и гемолитическую систему (эритроциты барана и сыворотку с антителами к ним). Если в первой реакции предположительное определение антител или антигенов было правильным, и образовался комплекс антиген-антитело, то комплемент будет с ними связываться. В итоге эритроциты барана останутся в пробирке неповрежденными (содержимое пробирки имеет вид темной крови). В таком случае реакция связывания комплемента является положительной.
Если антигены и антитела не соответствуют друг другу, то комплекс антиген-антитело не образуется. Комплемент вступает во взаимодействие с комплексом, образованным эритроцитами барана и антителами к ним. В этом случае эритроциты барана под воздействием комплемента разрушаются и содержимое пробирки становиться ярко-красным («лаковым»). Тогда реакция связывания комплемента является отрицательной. В зависимости от количества реагентов и исследуемого материала можно определить титр антител в крови пациента.
Этот способ диагностики используют для выявления инфекционных заболеваний, например сифилиса, клещевого энцефалита. Исследуют парные сыворотки от пациента (взятые с определенным временным интервалом). Если происходит нарастание титра антител в повторно взятой сыворотке крови в несколько раз, значит, инфекционный процесс развивается или заболевание перенесено недавно.

Источник: analizy.vse-zabolevaniya.ru