ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК
Понятие резус-фактор — слишком общее (и устаревшее). Система резус антигенов многообразна. Современные методы исследования позволяют делать тесты индивидуально по резусу D, С, с, Е, е. Кроме этого, необходимо выявлять случаи со слабым D-антигеном или вариабильным D-антигеном. Вся эта информация тоже крайне важна при подборе донора в случае необходимости.
Ход работы. Определение резус-принадлежности крови проводится с помощью стандартной универсальной сыворотки «антирезус» для всех групп крови. В пробирку вводят одну каплю (0,05 мл) исследуемой крови или эритроцитов и добавляют 1—2 капли стандартного универсального реагента «антирезус» той же группы крови. Перешивают содержимое путем встряхивания пробирки и помещают ее на водяную баню на 5 минут при температуре 370С, так как иммунная реакция с антигеном требует оптимальной температуры. Как правило, агглютинация наступает в течение 3-5 мин. По истечении этого времени для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2—3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешивают (но взбалтывая!), 2—3 раза переворачивая пробирку.
В некоторых случаях не представляется возможным определение резус-принадлежности реципиента, тогда пользуются индивидуальной пробой на резус-совместимость крови донора и реципиента.
На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки крови больного и маленькую каплю переливаемой крови, их смешивают и ставят на водяную баню (42-45 °С) на 10 мин. Если наступила агглютинация, то кровь донора несовместима с кровью реципиента и ее переливать нельзя.
Трактовка результатов. Пробирки просматривают на свет невооруженным глазом. При положительном результате агглютинация выражается в появлении хлопьев из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости. При отрицательном результате жидкость в пробирке остается равномерно окрашенной, без признаков агглютинации эритроцитов. Результат учитывают как истинный после проверки контрольных, образцов, т. е. при положительном результате со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногруппными с исследуемой кровью.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ
Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей – носителей анти-D и анти-С гибридом. Цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с предназначены для определения резус принадлежности крови.
Ход определения. На планшет индивидуальными пипетками наносятся цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с по одной большой капле (0,1мл). Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 мл). Кровь смешивается с реагентом. Наблюдается ход реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение трех минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек., но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности резус-антигена. При использовании цоликлонов термостатировать не требуется,
Интерпретация результатов. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Наличие агглютинации с Анти-D, Анти-С или Анти-с цоликлонами свидетельствует о том, что кровь резус-положительная, а отсутствие агглютинации – что кровь резус-отрицательная.
Сохранить в соцсетях:
Источник: krasgmu.net
Комплексное исследование, позволяющее оценить принадлежность крови пациента к одной из групп по системе ABO и определить наличие/отсутствие Rh-антигена.
Для чего используется этот анализ?
- Для определения принадлежности группы крови человека к одной из групп по системе АВО и системе резус.
Когда назначается анализ?
- При переливании компонентов крови реципиенту;
- при сдаче крови донором;
- при подготовке к хирургическим операциям;
- при планировании беременности или во время нее;
- при подозрении на фетальный эритробластоз;
- при подготовке к трансплантации костного мозга, почки, печени и других органов и тканей;
- при поступлении лиц на военную службу, в ряды МЧС и другие силовые структуры.
Метод исследования
Реакция агглютинации.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до анализа.
Общая информация об исследовании
Каждый человек обладает уникальным сочетанием антигенов на поверхности своих клеток, в том числе и эритроцитов. На сегодняшний день известно более 250 антигенов эритроцитов, образующих около 30 антигенных систем. В клиническом плане наиболее важными из них являются система АВО и система резус.
Система АВO — основная система совместимости крови. Она представлена агглютиногенами A и B, являющимися гликопротеинами и расположенными на поверхности эритроцитов, и агглютининами альфа и бета, относящимися к классу иммуноглобулинов IgM и циркулирующих в плазме крови. В зависимости от комбинации этих агглютиногенов и агглютининов, выделяют 4 группы крови по системе АВО.
Первая (I) группа крови (самая распространенная в европейской популяции, 42 % населения) также называется O-группа, при ней на поверхности эритроцитов агглютиногены A или B отсутствуют, в плазме выявляются агглютинины альфа и бета.
Вторая (II) группа крови (37 %) также называется A-группа, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген A, в плазме выявляется агглютинин бета.
Третья (III) группа крови (13 % населения) также называется B-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствует агглютиноген B, в плазме выявляется агглютинин альфа.
Четвертая (IV) группа крови (самая редкая, всего 8 % населения) также называется AB-группа крови, на поверхности эритроцитов присутствуют агглютиногены обоих типов A и B, в плазме агглютинины альфа и бета отсутствуют.
Система резус также состоит из нескольких антигенов, главный из которых называется антиген D, или резус-фактор. Примерно у 85 % людей на поверхности эритроцитов можно выявить резус-фактор (резус-положительная кровь).
Принадлежность крови человека к определенной группе по системе АВО и системе резус является генетически обусловленной и не меняется в течение всей жизни.
Для чего используется исследование?
- Для определения принадлежности группы крови человека к одной из групп по системе АВО и системе резус.
Что означают результаты?
Результаты определения группы крови по системе АВО | |||
---|---|---|---|
Агглютиногены на поверхности эритроцитов | Агглютинины в сыворотке крови | Группа крови, обозначение римскими цифрами | Группа крови, обозначение латинскими буквами |
Отсутствуют | альфа и бета | I | O |
A | бета | II | A |
В | альфа | III | B |
AB | Отсутствуют | IV | AB |
Результаты определения резус-фактора | |
---|---|
Резус-фактор на поверхности эритроцитов | |
Найден | Резус-положительная кровь, Rh+ |
Не найден | Резус-отрицательная кровь, Rh- |
Что может влиять на результат?
- Наличие в сыворотке больного специфических белков (М-протеина, холодовых антител) или некоторых бактерий может препятствовать реакции агглютинации, используемой в тесте.
- Прием некоторых лекарственных средств (леводопы, метилдопы) может приводить к получению ложноположительных результатов анализа резус-фактора.
Источник: vira-center.ru
Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D по системе AB0 и системе Резус
Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.
Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?
– цоликлон анти-А;
– цоликлон анти-В;
– цоликлон анти-D;
– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.
Алгоритм и порядок определения группы крови
Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.
Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.
Расшифровка результатов определения группы крови
- если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);
- если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);
- если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
- если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.
Определение резус-фактора цоликлоном Анти-D
На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.
- если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh+)
- если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D, то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh—)
Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).
Источник: anest-rean.ru
Резус принадлежность
Кровь каждого из нас может относится к одной из четырех групп, которые определяются и маркируются по системе АВ0. Данные о принадлежности к той или иной группе крови мы получаем еще при рождении и они остаются актуальными в течение всей нашей жизни, хотя у наших потомков они могут быть иными. Но знания только группы крови недостаточно — важно получить сведения про крайне важную особенность собственной крови — резус принадлежность.
Резус-фактор — что это
Белок (антиген), находящийся в эритроцитах крови, называется резус-фактором. Нахождение в крови этого антигена или его отсутствие носит название резус-принадлежности. Подавляющее большинство населения всех стран земного шара имеет в своей крови резус-фактор (до 85% всех живущих на планете), а оставшиеся люди его лишены. Те, у кого зарегистрирован специфический антиген, считаются носителями положительного фактора, а те, у кого он отсутствует — имеющими отрицательный фактор.
Методика получения данных
Анализ может выполняться двумя основными способами:
- Классический при помощи чашек Петри.
- Экспресс-метод.
Также может использоваться метод быстрого получения результата при помощи желатина или папаина.
Для проведения экспресс-диагностики требуется особая сыворотка, универсальная для всех групп крови. Проба выполняется без подогрева. Все методы определения резус-принадлежности основаны на реакции агглютинации, то есть склеивания. Если она происходит, это свидетельствует о наличии резус-фактора, если же нет — то резус-фактор отрицательный.
В каких случаях необходимо знать свою резус-принадлежность
Такие сведения необходимы в следующих ситуациях:
- При подготовке к оперативному вмешательству.
- При экстренной госпитализации (острое состояние, травма, авария и так далее).
- Во время беременности для контроля возможного возникновения резус-конфликта между кровью матери и ребенка.
- Для людей, подвергающих себя особому риску и могущих нуждаться в экстренном переливании крови.
На сайте www.kdllab.ru выложена обширная информация о назначении, специфике и проведении различных диагностических анализов, в том числе и о резус-принадлежности. Также в свободном доступе имеется множество полезной информации о нормах всех показателей для разных видов и типов анализов с учетом возраста и половой принадлежности отдельно взятого человека.
Источник: griskomed.ru