Реакция геллера на инсулин

Аллергические реакции на инсулин встречались чрезвычайно часто в прошлые годы при применении животных плохо очищенных инсулинов. По мере улучшения способов очистки и производства свиного инсулина частота этих реакций стала заметно уменьшаться. В последние годы они наблюдаются достаточно редко благодаря переходу на высококачественные человеческие инсулины. При этом наиболее частой причиной аллергии являются вещества, замедляющие всасывание и пролонгирующие действие инсулина — протамин, цинк и т.д., так что наиболее часто в настоящее время встречается аллергия к пролонгированным препаратам инсулина. Однако в отдельных случаях аллер­гические реакции появляются на простой (человеческий) инсулин, что являет­ся, вероятно, отражением общей аллергизации организма. Аллергия к инсули­ну нередко сочетается с локальными липоатрофиями. Она чаще наблюдается у людей, склонных к развитию аллергических реакций на другие лекарствен­ные препараты, например, антибиотики.

мптомы инсулиновой аллергии появляются обычно не менее чем через 7 дней от начала лечения инсулином. Наиболее часто они регистрируются через 6 мес. от начала инсулинотерапии, особенно у пациентов, получавших инсулин по тем или иным причинам не­постоянно. У детей это может быть связано с ремиссией заболевания либо при отказе родителей от инсулина в надежде «вылечить диабет средствами нетра­диционной медицины». Повторное введение инсулинового антигена в сенси­билизированный организм может вызвать реакцию гиперчувствительности к инсулину вплоть до генерализованной аллергии.

Различают местные аллергические реакции на инсулин и общую генерали­зованную аллергию.

Местная аллергическая реакция проявляется в виде отечности кожи, гипи- ремии, уплотнения, зуда, иногда боли в месте инъекции инсулина.

По своим проявлениям выделяют три типа кожной аллергической реакции на инсулин: реакция немедленного типа, реакция замедленного типа и местная анафилактическая реакция (феномен Артюса).

Местная аллергическая реакция немедленного типа встречается наиболее часто и появляется непосредственно после введения инсулина в виде жжения, непреодолимого зуда, покраснения, припухлости и уплотнения кожи. Эти симптомы нарастают в последующие 6 часов и сохраняются в течение нес­кольких суток. Иногда местная аллергия может появляться в более мягкой форме в виде маленьких подкожных узелков, не видимых на глаз, но опреде­ляемых при пальпации. Основу реакции составляет неспецифичное серозно­экссудативное воспаление, развитие которого опосредовано гумаральным им­мунитетом — иммуноглобулинами класса 1дЕ и 1§С.

Местная реакция замедленного типа наблюдается значительно реже. Она проявляется теми же симптомами, что и реакция немедленного типа, но через 6-12 часов, достигает максимума через 24-48 часов и длительно сохраняется в виде плотного инфильтрата. Это высокоспецифичная к вводимому антигену реакция гиперчувствительности с активацией клеточного иммунитета. Кле­точную основу инфильтрата состаляют лимфоциты, моноциты и макрофаги.

Феномен Артюса наблюдается чрезвычайно редко и представляет собой гиперэргическую реакцию промежуточного типа, в основе которой лежит экс­судативно-геморрагическое воспаление. Клинически оно проявляется через 1­8 часов после инъекции отеком, уплотнением и резкой гипиремией кожи, ко­торая постепенно приобретает багрово-черную окраску. Через несколько ча­сов может начаться обратное развитие процесса либо прогрессирование его вплоть до некроза пораженного участка кожи с последующим рубцеванием. Развивается в большинстве случаев при внутрикожном попадании инсулина.

Эти реакции имели более 50% больных, получавших плохо очищенные ин- сулины, и менее 2% больных, получающих современные высококачественные инсулины.

Местные аллергические реакции на инсулин могут сопровождаться ухудше­нием показателей углеводного обмена и увеличением потребности в инсулине.

По многочисленным наблюдениям, через 1-3 мес. аллергические реакции на инсулин в большинстве случаев спонтанно исчезают. Тем не менее, при их по­явлении необходимо попытаться подобрать инсулин лучшего качества, к кото­рому отсутствует аллергия. При подборе препарата может использоваться внут- рикожная проба на гиперчувствительность с различными инсулинами. В случае аллергии на пролонгированный инсулин целесообразна замена его на инсулин с другими пролонгирующими соединениями. В этой ситуации также возможен временный перевод на дробное введение инсулина только короткого действия.

Определенные сложности возникают при появлении аллергии на челове­ческие инсулины короткого действия, особенно полученные генно-инже­нерным способом, поскольку лучшей альтернативы им не было. Подобное наблюдение имелось в нашей практике, когда у 9-летней пациентки, стра­давшей диабетом в течение 3 лет, появилась аллергия по типу реакции не­медленного типа на актрапид. Поначалу непостоянные аллергические реак­ции стали появляться практически на каждую инъекцию. Это сопровожда­лось декомпенсацией углеводного обмена и увеличением суточной дозы ин­сулина с 30 до 42 ед. При попытке перевода больной на Хумулин Р наблюда­лось усиление аллергии. Назначение антигистаминных препаратов давало лишь временный эффект. Удачной оказалась попытка перевода девочки на аналог человеческого инсулина Хумалог, который она получает уже на про­тяжении двух лет без рецидива аллергии к инсулиновым препаратам. У больной снизилась потребность в инсулине до исходной, стабилизирова­лось течение диабета. Это наблюдение подтверждает заключение, что в ка­честве антигена может выступать сама молекула инсулина. При этом анало­ги человеческого инсулина могут использоваться при подборе препарата, не вызывающего аллергии.

В ряде случаев при местных аллергических реакциях помогает назначение антигистаминных препаратов, а также местное применение глюкокортикоид- ных препаратов. Нельзя вводить антигистаминные препараты в одном шпри­це с инсулином из-за их несовместимости. Местные инъекции глюкокортико- идов в малых дозах вместе с инсулином у небольшой части больных дают по­ложительный противоаллергический эффект.

Генерализованная аллергическая реакция на инсулин встречается менее чем у 0,05% госпитализированных больных и почти не наблюдается в детс­ком возрасте. Клиническая картина в зависимости от тяжести может быть представлена разнообразной симптоматикой, начиная с аллергической кожной сыпи, резкой слабости, лихорадки, сердцебиения и кончая сосудис­тым отеком и бронхоспазмом. Острый анафилактический шок с респира­торным и сосудистым коллапсом может наблюдаться как крайняя степень генерализованной аллергии. В отдельных случаях клиническая картина сходна с проявлениями сывороточной болезни: артралгии, миалгии, лихо­радка, головная боль, гастроинтестинальные симптомы. При этом могут наблюдаться аутоиммунная тромбоцитопеническая пурпура, а также гемо­литическая анемия.

При возникновении генерализованной аллергической реакции необходи­мо установление антигена, которым может быть не обязательно инсулин. Внимательно собранный анамнез, временной анализ употребления других лекарственных препаратов поможет выбрать правильное направление поис­ка. При необходимости может быть проведена внтурикожная проба с инсули­ном. При этом пациентам вводится очищенный бычий, свиной и человечес­кий инсулина, в начальной дозе 0,001 ед. в 0,02 мл изотонического раствора хлористого натрия, при отсутствии местной реакции — 0,1 ед, затем 1 ед. При отсутствии ответа может быть сделан вывод, что другой аллерген, но не инсу­лин, вызвал симптоматику.

Лечение генерализованной реакции зависит от степени ее выраженности. В легких случаях (сыпь на коже без ухудшения общего состояния) — срочная за­мена инсулина на более очищенный, по возможности, человеческий инсулин. В более тяжелых случаях необходима срочная госпитализация для проведения десенсибилизирующей терапии.

Десенсибилизация проводится либо специально приготовленными для этой цели наборами, либо готовящимися самостоятельно растворами сви­ного или человеческого инсулина так, чтобы первая доза составляла 0,001 ед в 0,1 мл изотонического раствора хлористого натрия, затем, с 30-минут­ным интервалом — 0,002-0,004-0,01-0,02-0,04-0,1-0,2-0,4-1-2 и 8 ед. Первые две дозы вводятся внутрикожно, остальные — подкожно. Если появляется локальная аллергическая реакция, необходимо вернуться на 2 разведения назад, а затем продолжать в том же порядке.
ли у пациента имеется ре­акция на первую инъекцию, нужно начинать десенсибилизацию с разведе­ния 0,0001 ед. Эта процедура дает результат у 94% больных. Во время де­сенсибилизации нельзя вводить глюкокортикоидные или антигистамин- ные препараты, так как они могут маскировать местную аллергическую реакцию. Однако эти средства и адреналин в готовом для употребления виде должны находиться рядом на случай развития анафилактических ре­акций.

Механизм десенсибилизации не совсем ясен. Предполагается, что происхо­дит истощение медиаторов гиперчувствительности для большинства клеток и базофилов. На протяжении процесса десенсибилизации падает уровень цир­кулирующих инсулинспецифических 1§С.

После десенсибилизации пациент переводится на постоянные инъекции инсулина. Важно не допускать пропуска в их введении, чтобы не вызвать ре­цидива аллергии и необходимости проведения повторной десенсибилизации. Пациентов, у которых десенсибилизация невозможна либо не дала желаемого эффекта, лечат пероральными антигистаминными или глюкокортикоидными препаратами, либо теми и другими в комбинации.

Источник: zakon.today

Процедуры и операции

Средняя цена

Эндокринология / Консультации в эндокринологии и диетологии	от 563 р. 745 адресов
Дерматология / Консультации в дерматологии	от 150 р. 724 адреса
Аллергология / Консультации в аллергологии	от 800 р. 370 адресов
Эндокринология / Консультации в эндокринологии и диетологии	от 950 р. 14 адресов
Аллергология / Аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ)	28734 р. 107 адресов
Аллергология / Аллергенспецифическая иммунотерапия (АСИТ)	5018 р. 105 адресов
Аллергология / Консультации в аллергологии	2375 р. 4 адреса
Эндокринология / Лабораторная диагностика в эндокринологии / Исследования при сахарном диабете	228 р. 531 адрес
Анализы / Аллергологические исследования / Маркеры аллергических реакций	618 р. 400 адресов
Ревматология / Лабораторные исследования в ревматологии / Определение уровня иммуноглобулинов	390 р. 375 адресов

Источник: www.KrasotaiMedicina.ru

1. Качественные реакции на инсулин

Инсулин – низкомолекулярный простой белок, синтезируемый -клетками островковой ткани поджелудочной железы. Качественные реакции, характерные для белков, подтверждают белковую природу инсулина.

а) Биуретовая реакция

Ход работы. К 10 каплям раствора инсулина прибавляют 5 капель 10%-го раствора гидроксида натрия и 1 каплю 1%-го раствора сульфата меди. Жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.

б) Реакция Фоля

Ход работы. 5 капель раствора инсулина смешивают с 5 каплями реактива Фоля и смесь кипятят 1-2 мин до появления бурого осадка.

в) Реакция Милона

Ход работы. В пробирке смешивают 10 капель раствора инсулина и 2-3 капли реактива Милона. Смесь осторожно нагревают до образования осадка в виде сгустка красного цвета.

г) Реакция Геллера

Ход работы. Пробирку с 10 каплями концентрированной азотной кислоты наклоняют под углом 45^о и осторожно по стенке приливают 10 капель раствора инсулина. На границе двух жидкостей образуется белое кольцо.

д) Реакция с раствором гидроксида натрия

Ход работы. В пробирку приливают 10 капель раствора инсулина, а затем по каплям 0,1%-й раствор гидроксида натрия до выпвдения хлопьевидного осадка. Осадок растворяется при подкислении 0,5%-м раствором уксусной кислоты до рН=2,5-3,5 (по универсальной индикаторной бумаге).

е) Реакция с сульфосалициловой кислотой

Ход работы. К 10 каплям раствора инсулина прибавляют 3-5 капель 20%-го раствора сульфосалициловой кислоты до выпадения белого осадка.

2. Качественные реакции на адреналин

Адреналин – гормон, который синтезируется в мозговом веществе надпочечников. По химической природе адреналин является производным пирокатехина и легко окисляется, превращаясь сначала в дегидроадреналин, а затем в неактивный хинон красного цвета – адренохром:

Адренохром может участвовать в дальнейших окислительно-восстановительных реакциях или полимеризуется с образованием высокомолекулярного пигмента – меланина коричневого цвета.

Качественные реакции на адреналин обусловлены его окислением до адренохрома или реакционной способностью пирокатехинового кольца.

а) Реакция с хлорным железом

При добавлении к раствору адреналина хлорида железа (III) жидкость окрашивается в изумрудно-зеленый цвет, характерный для комплексного соединения типа фенолята, образующегося за счет гидроксильных групп пирокатехинового кольца. В щелочной среде окраска меняется на красную, а затем коричневую вследствие появления адренохрома и продуктов его полимеризации.

Ход работы. 3-5 капель 0,1%-го раствора адреналина смешивают в пробирке с 1 каплей 1%-го раствора хлорного железа. Появляется зеленое окрашивание. Затем добавляют 1 каплю 10%-го раствора гидроксида натрия, при этом окраска переходит в вишнево-красную, а затем в коричневую.

Эту же реакцию делают с 0,05%-м раствором пирокатехина

б) Диазореакция

При взаимодействии диазореактива с адреналином образуется азокраситель красного цвета. Диазореактив – смесь сульфаниловой кислоты и азотистой кислоты (или ее соли):

Ход работы. В пробирку вносят 3 капли 1%-го раствора сульфаниловой кислоты, 3 капли 5%-го раствора азотистокислого натрия, 5 капель 0,1%-го раствора адреналина и 3 капли 10%-го раствора углекислого натрия. Жидкость окрашивается в красный цвет.

в) Реакция с нитритно-молибденовым реактивом

Ход работы. В пробирку наливают 5 капель 0,1%-го раствора адреналина, 5 капель 5%-го раствора соляной кислоты и 5 капель нитритно-молибденового реактива. Смесь перемешивают. Появляется желто-оранжевое окрашивание, которое при добавлении 3-5 капель 10%-го раствора гидроксида натрия меняется на малиново-красное а после внесения 3-5 капель концентрированной соляной кислоты становится лимонно-желтым.

г) Реакция с реактивом Фолина

Входящие в состав реактива Фолина соли фосфорновольфра-мовой и фосфорномолибденовой кислот при взаимодействии с фено-лами восстанавливаются с образованием оксидов, окрашенных в синий цвет.

Ход работы. В пробирке смешивают 2 капли 0,1%-го раствора адреналина и 5 капель 10%-го раствора карбоната натрия. Через 3-4 минуты добавляют 1 каплю реактива Фолина. Появляется синее окрашивание.

д) Реакция с йодатом калия

Адреналин образует в кислой среде с йодноватистокислым калием соединение красно-фиолетового цвета.

Ход работы. В пробирку вносят 5 капель 0,1%-го раствора адреналина, 2 капли 10%-го раствора КIО₃ и 5 капель 10%-го раствора уксусной кислоты. Содержимое пробирки нагревают до температуры 60-65 ^оС и наблюдают появление красно-фиолетового окрашивания.

3. Качественная реакция на тироксин

Тироксин – йодсодержащий гормон щитовидной железы:

Тироксин содержится в тиреоидине – препарате, получаемом из обезжиренной и высушенной щитовидной железы крупного рогатого скота. Тироксин, освободившийся при разрушении тиреоидина, подвергают щелочному гидролизу, в результате которого образуется йодид калия. Йод из йодистого калия вытесняют йодноватистокислым калием и обнаруживают с помощью качественной реакции с крахма-лом (синее окрашивание в кислой среде):

5KI + KIO₃ + 6HCl  3I₂ + 6KCl + 3H₂O,

I₂ + крахмал  синее окрашивание.

Ход работы

а) Гидролиз тиреоидина

5 таблеток тиреоидина тщательно растирают в фарфоровой ступке. Порошок переносят в коническую колбу, добавляют 5 мл 10%-го раствора бикарбоната калия и 5 мл дистиллированной воды. Колбу закрывают пробкой с обратным холодильником и смесь кипятят 15 мин (с момента закипания) при умеренном нагревании.

б) Обнаружение йода в гидролизате

В пробирку вносят 24 капли охлажденного гидролизата и добавляют по каплям 10%-й раствор серной кислоты до кислой реакции (на лакмус). После подкисления прибавляют 3 капли 1%-го раствора крахмала и 5-10 капель 2%-го раствора йодноватисто-кислого калия (не следует добавлять избыток) до появления синего окрашивания.

4. Качественные реакции на фолликулин

Фолликулин (эстрон) – один из женских половых гормонов (эстрогенов) имеет стероидную структуру:

а) Реакция с концентрированной серной кислотой.

При взаимодействии фолликулина с концентрированной серной кислотой образуется эфирное соединение соломенно-желтого цвета (фолликулинсульфат):

Ход работы. Пробирку с 20 каплями спиртового раствора фолликулина помещают на 5-10 минут в кипящую водяную баню для удаления спирта. Затем добавляют 20 капель концентрированной серной кислоты и пробу снова выдерживают 5-10 минут в кипящей водяной бане. Жидкость постепенно приобретает соломенно-желтую окраску, переходящую в оранжевую и красно-бурую.

Если для анализа берут масляный раствор фолликулина, то реакция идет при комнатной температуре. В смеси из 3-5 капель масляного раствора фолликулина и 2 капель концентрированной серной кислоты развивается соломенно-желтое окрашивание.

б) Реакция с реактивом Фолина

При взаимодействии фолликулина с реактивом Фолина появляется синее окрашивание, характерное для фенольного радикала.

Ход работы. В пробирку вносят 5 капель раствора фолликулина, 2-3 капли 30%-го раствора гидроксида натрия и 2-3 капли реактива Фолина. Смесь окрашивается в синий цвет.

в) Диазореакция

Ход работы. В пробирку наливают 1 мл спиртового раствора фолликулина, 1 мл 10%-го раствора карбоната натрия и 1 мл диазореактива (0,5 мл 1%-го раствора сульфаниловой кислоты смешивают с 0,5 мл 5%-го раствора нитрита натрия). Постепенно возникает бледно-желтое окрашивание.

г) Реакция с гидроксидом натрия

При взаимодействии фолликулина с гидроксидом натрия образуется хорошо растворимый фенолят фолликулина.

Ход работы. В две сухие пробирки наливают по 10 капель спиртового раствора фолликулина. В первую пробирку добавляют 1 мл дистиллированной воды и отмечают образование эмульсии фолликулина. Во вторую пробирку прибавляют 1 мл 30%-го раствора гидроксида натрия и содержимое перемешивают. Во второй пробирке помутнения раствора нет, так как в щелочной среде образуется растворимый фенолят эстрона.

д) Реакция на 17-кетогруппу

Ход работы. В сухую пробирку вносят 5 капель раствора фолликулина, 5 капель 10%-го раствора гидроксида натрия и 5 капель 2%-го спиртового раствора м-динитробензола. Через 5-8 мин развивается красное окрашивание.

5. Качественные реакции на кортикостероиды

Кортикостероиды – гормоны, синтез которых происходит в корковом слое надпочечников. К кортикостероидам относятся дезоксикортикостерон, альдостерон, кортикостерон, гидрокортизон (кортизол) и кортизон. Все они – вещества стероидной структуры, в молекулах которых содержатся кето- и гидроксигруппы:

а) Реакция на кортизол

Кортизол, как и другие кортикостероиды, дает цветную реакцию с синим тетразолием, которая основана на его восстановлении за счет гидроксикетонной группы у 17-го углеродного атома гормона.

Ход работы. В пробирку наливают 1 мл спиртового раствора котризола (20 мкг/мл), 5 капель 10%-го раствора гидроксида тетра-метиламмония и 5 капель 5%-го спиртового раствора синего тетразолия. Содержимое пробирки перемешивают и помещают в темноту на 25 мин. Жидкость окрашивается в розовый цвет.

б) Реакция на дезоксикортикостерон

Ход работы. В пробирке смешивают 1 каплю масляного раствора дезоксикортикостерон-ацетата, 3-4 капли 96%-го этанола и 3-4 капли концентрированной серной кислоты. Смесь нагревают до кипения, охлаждают, добавляют еще 15 капель концентрированной серной кислоты и снова нагревают до кипения. Появляется синяя окраска.

в) Качественная реакция на 17-кетостероиды в моче

(реакция Циммермана)

17-кетостероиды являются конечным продуктом обмена гормонов коры надпочечников и половых гормонов. Они характеризуются наличием кетогруппы при 17-м углеродном атоме циклопентанпергидрофенантренового ядра. Различные 17-кетостеро-иды отличаются наличием или отсутствием функциональных групп у 11-го атома углерода, либо ароматичной структурой кольца А. Общая химическая формула 17-кетостероида:

В моче 17-кетостероиды находятся в основном в виде глюкуронидов. Содержание 17-кетостероидов в суточной моче здоровых людей зависит от возраста и пола. Так, у детей до 6 лет оно равно 3-4 мг/сутки, а с 6 до 12 лет – 5-10 мг/сутки. Суточная моча женщин детородного возраста содержит 6-15 мг 17-кетостероидов, а мужчин – 15-25 мг.

Количество 17-кетостероидов в моче меняется при гипер- и гипофункции надпочечников, аденогипофиза и семенников.

Так, при болезни Аддисона оно составляет 1/5-1/3 нормы, а при болезни Симмондса почти равно нулю. Содержание 17-кетостероидов в моче также понижено при гипотиреозе, циррозе печени, гипофизар-ной карликовости, недостаточной функции семенников.

Количество 17-кетостероидов в моче повышено при акромегалии, синдроме Иценко–Кушинга, андрогенитальном синдроме, опухолях семенников и надпочечников. Так при опухолях семенников оно достигает 1500 мг/сутки, а при опухолях надпочечников – до 2000 мг/сутки.

Реакция Циммермана основана на взаимодействии 17-кетосте-роидов с метадинитробензолом в щелочной среде с образованием продуктов конденсации вишнево-красного или розово-фиолетового цвета.

Ход работы. В сухую пробирку вносят 5 капель мочи, 5 капель 2%-го спиртового раствора м-динитробензола и 5 капель 30%-го раствора гидроксида натрия, перемешивают. Через 2-3 мин появляется вишнево-красное окрашивание, характерное для 17-кетостероидов.

Эту же реакцию можно сделать иначе: пробирку с 20 каплями мочи наклоняют под углом 45^о и медленно, осторожно по стенке добавляют 30 капель 2%-го спиртового раствора мета-динитробензола. Затем также по стенке прибавляют 6 капель 24%-го спиртового раствора гидроксида натрия. Верхний слой окрашивается в розово-фиолетовый цвет

Техника безопасности

• Осторожно обращайтесь с концентрированными кислотами и щелочами.

• Источник: refdb.ru

  2.10. Практическая работа «Качественные реакции на гормоны».

  Цели практической работы:

  • закрепить знания о функциях гормонов в организме;

  • научиться проводить качественные реакции на гормоны.

  Задания для самостоятельной работы:

  1. Перепишите в тетрадь принцип и методику проведения практической работы.

  2. Оборудуйте рабочее место для практической работы.

  3. Выполните практическую работу.

  4. Оформите результаты работы оформить в виде таблицы:

  № п/п	Ход работы. Рисунки.	Наблюдения	Выводы

  5. Сделайте вывод по работе.

  6. Ответьте на дополнительные вопросы.

  Реактивы: Растворы горомнов: инсулина, адреналина, кортизола (спиртовой). 10 % гидроксид натрия. 30 % гидроксид натрия. 1 % сульфат меди. 20 % сульфасалициловая кислота. 5 % ацетат свинца. 1 % сульфаниловая кислота. Азотная кислота конц. 3 % хлорид железа (3). 5 % нитрит натрия. 10 % карбонат натрия. 2 % м-динитробензол (спиртовой). Раствор гидроксида тетраметиламмония. Раствор синего тетразолия. Моча.

  Оборудование: Пипетки глазные – 2 шт. Пробирки – 4 шт. Спиртовка. Пробиркодержатель.

  Опыт 1. Качественные реакции на инсулин.

  Принцип:

  Инсулин является гормоном белковой природы, поэтому для него будут характерны все качественные реакции на белки.

  1. Обнаружение инсулина биуретовой реакцией.

  • В пробирку к 5 каплям раствора инсулина прибавьте 5 капель 10% раствора едкого натра и 1 каплю 1 % раствора сернокислой меди.

  • Смесь перемешайте. Наблюдается появление фиолетового окрашивания. Объяснить механизм реакции.

  2. Обнаружение инсулина реакцией с сульфосалициловой кислотой.

  • В пробирку внесите 1 мл раствора инсулина, добавьте 5 капель 20% раствора сульфосалициловой кисло­ты. Наблюдается выпадение осадка белого цвета.Объясните механизм реакции.

  3. Обнаружение инсулина реакцией Фоля.

  • В термостойкую пробирку внесите 5 капель раствора инсулина, 5 капель 30% раствора едкого натра и 1—2 капли 5% раствора уксуснокислого свинца.

  • Смесь нагрейте. При длительном нагревании жидкость в пробирке буреет и выпа­дает черный осадок сернистого свинца.Объяснить механизм реакции.

  4. Реакция Геллера на инсулин.

  • К 10 каплям концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке пробирки прилейте равный объем (10 капель) раствора инсулина.

  • Пробирку наклоните под углом 45° так, чтобы жидкости не смешивались. На гра­нице двух жидкостей образуется белый аморфный осадок в виде небольшого кольца.

  Опыт 2. Качественные реакции обнаружения адреналина.

  Принцип:

  Адреналин (метиламиноэтанолпирокатехин) – гормон мозгового вещества надпочечников – дает реакции, характерные для пирокатехинов. Адреналин с ионами железа (III) образует соединение изумрудно-зеленого цвета, легко окисляется диазореактивом с образованием адренохрома красного цвета.

  1. Реакция с хлоридом железа (III).

  • В пробирку внесите 1 мл адреналина (1:1000), при­бавьте 1 каплю 3% раствора хлорида железа (III) и перемешайте. Появляется изумрудно-зеленое окраши­вание.

  • К смеси добавьте 1 каплю 10% раствора едкого натра — возникает вишнево-красное окрашивание.

  2. Реакция с диазореактивом.

  • К 1 мл 1% сульфаниловой кислоты прибавьте 1 мл 5% раствора нитрита натрия (получается диазореактив).

  • К диазореактиву добавьте 1,5 мл раствора адреналина (1:1000) и 1мл 10% раствора карбоната на­трия.

  • Смесь перемешайте. Раствор окрашивается в красный цвет.

  Опыт 3. Качественное обнаружение 17-кетостероидов в моче с помощью m-динитробензола.

  Принцип:

  К «17-кетостероидам» относят стероиды, которые имеют карбонильную группу у 17 углеродного атома. Это метаболиты горомнов коры надпочечников и половых желез. 17-кетокортикостероиды с м-динитробензолом в присутствии щелочи образуют окрашенное соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству стероидов в пробе.

  • В пробирку поместите 5 капель мочи, 5 капель 30% раствора едкого натра и 5 капель 2% спиртово­го раствора (в этаноле) m-динитробензола.

  • Смесь перемешайте. Через 2-3 минуты, при наличии 17-кортикостероидов, появляется красное окрашивание за счет образования продуктов конденсации циклопентанопергидрофенантрена с т-динитробензолом.

  Источник: StudFiles.net

  
  

  Все статьи про заболевание и лечение сосудов :

  Техника постановки периферического венозного катетера Вторичная лимфаденопатия Прибор холтеровского мониторирования Перикардиальный выпот Лекарство корвалол От чего появляется одышка и как лечить Минифлебэктомия притоков Компрессионные чулки для беременных как правильно выбрать