Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови


В настоящее время выявляемость хронического злоупотребления алкоголем не превышает 20%. При этом избыточное потребление алкоголя зачастую служит первопричиной развития многих заболеваний и должно своевременно выявляться как в ЛПУ первичного звена, так и специализированными учреждениями наркологического профиля. В настоящее время наиболее специфичным показателем, отражающим хроническое злоупотребление алкоголем, признан карбогидрат-дефицитный трансферрин (CDT). Методика SEBIA позволяет разделять изоформы трансферрина, присутствующие в сыворотке обследуемого, и проводить качественную и количественную оценку уровня карбогидрат-дефицитных фракций. На основании полученных данных делается вывод о наличии или отсутствии у пациента хронической алкогольной нагрузки.

CDT – это лабораторный маркер, признанный международным медицинским сообществом в качестве наиболее специфичного показателя хронического злоупотребления алкоголем.


С биохимической точки зрения термин «CDT» означает совокупность трех углевод-дефицитных изоформ (асиало-, моносиало- и дисиало) белка трансферрина – основного переносчика ионов железа Fe3+ в организме человека.

В норме содержание асиало- и дисиало- изоформ трансферрина не превышает 1,3% от общей концентрации трансферрина крови. Моносиалотрансферрин в сыворотке здоровых лиц не обнаруживается вовсе.

Хроническое употребление высоких и опасных доз алкоголя приводит к повышению концентрации карбогидрат-дефицитных изоформ (>1,3%), что позволяет использовать показатель CDT для диагностики хронического злоупотребления алкоголем.

Показатель CDT выгодно отличается от других маркеров злоупотребления такими характеристиками как:

  • возможность дифференцировки разового и/или умеренного употребления от хронического злоупотребления;
  • возможность отсроченной диагностики (на протяжении 1 месяца с момента хронического алкогольного эксцесса);
  • высокая специфичность и минимальный риск ложноположительных результатов.

Анализ CDT в исполнении систем Minicap и Capillarys-2 Flex Piercing

Minicap – это компактная, многофункциональная и полностью автоматизированная система капиллярного электрофореза от всемирно известного производителя – компании SEBIA, позволяющая выполнять оценку уровня карбогидрат-дефицитного трансферрина (CDT) в полном соответствии с требованиями международных стандартов.
Capillarys-2 Flex Piercing – аналог прибора Minicap, превосходящий его по производительности в 4 раза и рассчитанный на крупные лаборатории с большим потоком анализов.


Технология капиллярного электрофореза SEBIA представляет собой уникальное сочетание методов агарозного электрофореза и жидкостной хроматографии, являющихся «золотыми стандартами» среди разделительных методов, позволяя добиваться действительно непревзойденного качества исследований.

Более 80% от всего объема CDT тестов, ежегодно выполняемых по всему миру, осуществляется на системах капиллярного электрофореза SEBIA, что подтверждает их высокие аналитические и пользовательские характеристики.

Определение CDT методом SEBIA имеет ряд существенных преимуществ:

  • полное соответствие аналита текущему определению CDT (в настоящее время и до завершения программы международной стандартизации CDT, инициированной Международной Федерацией Клинической Химии (IFCC), к карбогидрат-дефицитному трансферрину принято относить сумму асиало-, моносиало- и дисиало- изоформ трансферрина);
  • возможность определения карбогидрат-дефицитных фракций по отдельности (требование IFCC для завершения международной стандартизации CDT);
  • возможность качественной оценки изоформ трансферрина с целью выявления интерференций и сопутствующих патологических состояний (профиль цирроза и пр.).

CDT тест производства SEBIA – единственный метод, прошедший широкомасштабные клинические испытания на российской популяции и взятый за основу материально-технической базы федеральных методических рекомендаций МЗ РФ «Диагностика, мониторинг хронического злоупотребления алкоголем и скрининг наиболее распространенных патологических состояний, обусловленных злоупотреблением» (утверждены 03 ноября 2013 года).

Спектр выполняемых приборами компании SEBIA методик анализов:

  • Определение карбогидрат-дефицитного трансферрина (методика CDT).
  • Белковые фракции сыворотки крови (методика PROTEIN(E)6).
  • Белковые фракции мочи (методика URINE).
  • Иммунотипирование (методика IMMUNOTYPING).
  • Фракции гемоглобина (методика HEMOGLOBIN(E)).
  • Гликированный гемоглобин (методика HbA1c).

Источник: c-d-t.ru

В настоящее время исследование углеводдефицитного трансферрина используют в качестве наиболее специфичного и надежного теста при подозрении на хроническое употребление больших доз алкоголя. Это может быть важно в различных социально-бытовых ситуациях при подозрении на злоупотребление алкоголем, в том числе при профессиональных осмотрах, а также при обследовании пациентов с заболеваниями, которые часто связаны с чрезмерным употреблением алкоголя (болезни печени, панкреатиты, депрессии).
тановление факта хронического злоупотребления алкоголем существенно для правильной интерпретации результатов лабораторных тестов и постановки верного диагноза. Алкогольную зависимость не всегда адекватно диагностируют при помощи опросников, хотя этот фактор доступен коррекции. Косвенные лабораторные признаки хронического злоупотребления алкоголем, обычно используемые в этих целях (повышение уровня фермента ГГТ – гамма-глутамилтрансферазы, среднего объема клеток крови – MCV, повышение уровня и изменение соотношения ферментов АСТ/АЛТ), часто недостаточно специфичны. В отличие от них, УДТ не изменяется при других заболеваниях (например, неалкогольных болезнях печени). На содержание УДТ не оказывают влияния лекарственные препараты – в частности, антидепрессанты или дисульфирам (препарат, используемый для лечения алкоголизма). Тест на углеводдефицитный трансферрин достоверно выявляет длительное употребление больших доз алкоголя (более 60 г/день в течение 2 недель). Повышения уровня углеводдефицитного трансферрина не отмечается при однократном применении большой дозы алкоголя, или при употреблении умеренных доз алкоголя. У пациентов из группы высокого риска злоупотребления алкоголем исследование УДТ можно использовать в мониторинге для выявления рецидивов. Чувствительность теста УДТ индивидуально несколько варьирует. По оценкам, чувствительность исследований УДТ в выявлении алкогольной зависимости достигает 60−70%, специфичность − 80−90%.
ибольшая специфичность теста отмечается при обследованиях мужчин старше 40 лет. Исследование менее специфично для женщин, особенно при беременности, а также в случае применения гормональной замещающей терапии или гормональных противозачаточных средств. Тест неприменим в случае подозрения на врожденные нарушения гликозилирования. Использование относительных единиц (процент от общего трансферрина) для оценки результата позволяет снизить вероятность искажения вследствие варьирования общего содержания трансферрина при анемии или во время беременности. 

Источник: www.invitro.ru

9.1. Общая характеристика маркера CDT

Трансферрин (Tf) – белок сыворотки крови, синтезирующийся преимущественно гепатоцитами, основной переносчик железа в организме. Молекула трансферрина состоит из трех структурных доменов: полипептидной цепи, двух независимых сайтов связывания ионов железа и двух комплексов N-гликанов (рис. 45). Все три домена характеризуются сильной вариабельностью, обеспечивая существенную микрогетерогенность молекул трансферрина.

45.tif

Рис. 45. Изоформы трансферрина и их содержание в сыворотке крови человека. Согласно классификации международной рабочей группы IFCC
к карбогидрат-дефицитному трансферрину относят асиало-,
моносиало- и -дисиало- изоформы трансферрина


Для диагностики хронического злоупотребления алкоголем наибольшее значение имеетвариабельность молекул трансферрина по структуре цепей N-гликанов. Цепочки N-гликанов молекул трансферрина могут различаться по степени разветвления, формируя би-, три- и тетра- антенны. Каждаяантенна может заканчиваться молекулой сиаловой кислоты, несущей отрицательный заряд. В зависимости от количества остатков сиаловой кислоты, связанных с антеннами углеводных цепей, в сыворотке крови человека обнаруживают до 9 вариантов (изоформ) трансферрина, начиная от асиало – и заканчивая октасиалотрансферрином. Процентное содержание этих изоформ в сыворотке крови строго упорядочено и у здорового человека составляет: < 1,5 % для гептасиало-Tf; 1–3 % для гексасиало-Tf;
12–18 % для пентасиало-Tf; 64–80 % для тетрасиало – Tf; 4,5–9 % для трисиало-Tf и < 2,5 % для дисиало-Tf. Асиало-, моносиало- и октасиалотрансферрин в норме не детектируется или обнаруживается в незначительных концентрациях: < 0,5 % для асиало-Tf; < 0,9 % для моносиало-Tf.

При хроническом злоупотреблении алкоголя гликозилирование трансферрина нарушается, что приводит к изменению процентного соотношения его изоформ в сторону повышения уровня низкосиалированных вариантов, называемых также карбогидрат-дефицитными, или CDT.
гласно классификации международной рабочей группы IFCC к карбогидрат-дефицитному трансферрину относят асиало-, моносиало- и дисиало-изоформы трансферрина. В настоящее время Американским Федеральным управлением по надзору за качеством пищевых и лекарственных препаратов (FDA) CDT признан единственным биологическим маркером, отражающим хроническое злоупотребление алкоголем.

Патомеханизм повышения уровня CDT в ответ на хроническое злоупотребление алкоголем заключается, главным образом, в том, что этанол и/или его метаболит – ацетальдегид влияют на синтезцепей N-гликанов в аппарате Гольджи, ингибируя активность галактозилтрансферазы и N-ацетилглюкозаминилтрансферазы и одновременно с этим повышая активность сиалидазы в плазматических мембранах печени. Этанол также вызывает дестабилизацию и снижение концентрации мРНК α-2,6-сиалилтрансферазы и снижение синтеза α-2,6-сиалилтрансферазы, обусловленное снижением активности сиалилтрансферазы, и, как следствие, уменьшение сиалирования молекул трансферрина.

Таким образом, CDT выгодно отличается от таких маркеров, как АЛТ, АСТ и ГГТ, т.к. в отличие от последних повышение его концентрации в наименьшей степени ассоциировано с органическим поражением печени или других органов (как алкогольного, так и неалкогольного генеза) или повышенным синтезом микросомальных ферментов. В отличие от других гликопротеинов, недостаток сиалирования изоформ трансферрина никак не связан с клиренсом пе-
чени или почек.


Таблица 20

Использование метода определения CDT для различных категорий населения



№ п/п

Категория населения

Основание для организации CDT скрининга

Периодичность скрининга

1

2

3

4

1

Больные алкоголизмом

Постановка на учет, контроль лечения

Первичный анализ осуществляется при освидетельствовании и/или госпитализации и далее на 21–28 день с момента начала терапии.

2

Лица, находящиеся на наркологическом профилактическом и диспансерном учете

Оценка стойкости ремиссии, выявление рецидивов

1 раз в месяц для лиц, находящихся на профилактическом учете и больных первой группы учета, находящихся на диспансерном учете;

1 раз в 2 месяца для больных второй группы учета, находящихся на диспансерном учете;

1 раз в 3 месяца для больных третьей группы учета, находящихся на диспансерном учете;

1 раз в 4 месяца для больных четвертой группы учета, находящихся на диспансерном учете

Диагностическое значение: При постановке на учет больных алкоголизмом имеет значение лабораторное подтверждение факта хронического злоупотребления алкоголем (положительный результат CDT теста).

Для объективизации контроля ремиссии больного алкоголизмом и принятия решения о снятии его с учета необходимо подтверждение отсутствия фактов приема алкоголя на протяжении длительного периода времени. Стойкость ремиссии подтверждается в случае получения отрицательных результатов CDT теста в течение всего периода диспансерного учета.

1

2

3

4

3

Работники, занятые отдельными видами профессиональной деятельности и деятельностью, связанной с источником повышенной опасности, на занятие которыми устанавливаются ограничения для больных наркоманией в соответствии с Перечнем, утвержденным постановлением Правительства РФ № 394 от 18.05.2011 г.

Поступление на службу

Однократно, при прохождении медицинского обследования при поступлении на службу

Плановая диспансеризация

При прохождении каждой плановой диспансеризации (но не реже 1 раза в год)

После происшествий

Однократно, не позднее 2-х календарных дней с момента происшествия

4

Военнослужащие, граждане, подлежащие призыву на военную службу и поступающие на военную службу по контракту

Поступление на службу

Однократно, при прохождении медицинского обследования при поступлении на службу

Плановая диспансеризация

При прохождении каждой плановой диспансеризации (но не реже 1 раза в год)

Диагностическое значение: Обследование на предмет хронического злоупотребления алкоголем имеет большое значение для работников, чья профессиональная деятельность сопряжена с повышенным риском для окружающих. Методы прямого определения алкоголя в биологических жидкостях в данном случае малоэффективны, т.к. обследуемые имеют возможность подготовиться к плановым обследованиям. Определение уровня CDT, напротив, является более эффективным средством оценки хронического злоупотребления алкоголем, т.к. период полураспада маркера составляет не менее 14–17 дней.

При плановой диспансеризации работников указанных профессий, а также сразу после инцидентов или происшествий для выявления возможной хронической алкогольной нагрузки, как фактора, способствующего возникновению чрезвычайной ситуации.

1

2

3

4

5

Мигранты

Медосвидетельство-вание

Однократно, при прохождении первичного медосвидетельствования и при каждом новом обращении за продлением вида на жительство и/или разрешения на работу

6

Лица, получающие водительское удостоверение или разрешение на владение оружием

Медосвидетельство-вание

Однократно, при прохождении медицинского осмотра и при каждой новой замене по истечению срока действия

Диагностическое значение: При обследовании мигрантов, а также лиц, получающих водительское удостоверение или разрешение на оружие, необходимо исключить факт хронического злоупотребления алкоголем, опосредующий повышенный риск психических и физических расстройств и связанную с этим потенциальную опасность для окружающих.

7

Лица, лишенные водительских прав по причине управления транспортным средством в состоянии алкогольного опьянения

Медосвидетельствование

Не реже 1 раза в 3 месяца на протяжении всего срока лишения прав и не реже 1 раза в 3 месяца на протяжении года после возврата водительского удостоверения.

Диагностическое значение: Согласно данным МВД более 40 % лиц, лишенных водительских прав по причине управления транспортным средством в состоянии алкогольного опьянения, совершают данное правонарушение повторно. В связи с этим лабораторный контроль хронической алкогольной нагрузки и недопущение злоупотребляющих лиц к управлению транспортным средством является эффективным средством профилактики повторных правонарушений и снижения аварийности и смертности на дорогах.

1

2

3

4

8

Профилактический мониторинг учащихся

Плановая и внеплановая диспансеризация

При прохождении каждой плановой или внеплановой диспансеризации (но не реже1 раза в год)

9

Социально-гигиенический мониторинг

Плановая и внеплановая диспансеризация

При прохождении каждой плановой или внеплановой диспансеризации

Диагностическое значение: При проведении мониторинга алкоголизации среди учащихся средних и высших учебных заведений, а также социально-гигиенического мониторинга, направленного на установление степени распространения алкоголизма среди различных социальных групп населения страны, наиболее важной задачей является выявление лиц, хронически злоупотребляющих алкоголем на максимально ранней стадии алкогольной зависимости. Это связано с тем, что на ранних стадиях развития алкогольной зависимости ее практически невозможно диагностировать при помощи других (клинических) признаков. Выявление же повышенного уровня CDT позволяет с высокой степенью вероятности подтвердить факт хронического злоупотребления, в т.ч. на стадии продрома, когда клинические проявления алкоголизма еще полностью отсутствуют, а эффективность лечебно-профилактических мероприятий максимальна. В то же время использование при мониторинге маркера CDT минимизирует возможности обследуемых «подготовиться» к анализу.

10

Контроль крови доноров

Выявление противопоказаний к донорству крови и ее компонентов

После каждого взятия крови

Диагностическое значение: Алкоголизм относится к группе абсолютных противопоказаний к донорству крови и ее компонентов. В связи с этим использование CDT–маркера алкоголизма при обследовании доноров является чрезвычайно обоснованным.

Источник: monographies.ru

1

  • Авторы
  • Резюме
  • Файлы
  • Ключевые слова
  • Литература

Злоупотребление алкоголем является одной из основных причин низкой продолжительности жизни в РФ. От трети до более половины смертей мужчин трудоспособного возраста составляют прямые и непрямые алкогольные потери [1, 2]. Помимо анализа социально-экономических и психологических факторов большое значение имеет исследование алкоголизма, позволяющее выявить молекулярные механизмы развития заболевания и нарушений, связанных с злоупотреблением алкоголем. В настоящее время во всем мире проводится исследование диагностических маркеров потребления алкоголя. Их используют при профессиональной диспансеризации, при возврате водительского удостоверения, изъятого по причине вождения в состоянии алкогольного опьянения, при наблюдении за ходом лечения больных алкоголизмом, при подготовке к хирургическому вмешательству. Наиболее специфичным и перспективным из таких маркеров для клинической практики является карбон-дефицитный трасферрин (CDТ) [3]. Среди существующих методик выявления граждан, страдающих хроническим алкоголизмом, наиболее распространенными являются способы позволяющие проводить анкетирование. К ним относятся тесты: CAGE, AUDIT, Сетка LeGo. Они просты для заполнения больными, легко и быстро оцениваются врачом, и в наибольшей мере учитывают национальные особенности « российского менталитета» и отношение к алкоголю [4, 5, 6].

Мировой опыт свидетельствует, что краткое анкетирование и элементарный врачебный осмотр являются качественным диагностическим инструментарием. Необходимо дополнительное использование тестов, которые повышают вероятность распознавания хронической алкогольной интоксикации (ХАИ). В первую очередь к ним относятся биохимические анализы, определяющие повышение активности гамма-глутамилтранспептидазы (GGT), аминотрансферазы [7]. В последние годы для объективной лабораторной диагностики хронической алкогольной интоксикации применяют качественное и количественное определение маркера карбогидрат-дефицитного трансферрина (CDT) в сыворотке крови больного [8].

Среди маркеров потребления алкоголя наиболее специфичным является карбондефицитный траснферрин. Трансферрин-белок, переносящий в клетки всех тканей тела ионы железа при их абсорбции в кишечнике или высвобождении из эритроцитов. Различие изоформ трасферрина определяется гликозилированием. Основная фракция трансферрина представлена изоформной с 4 остатками сиаловой кислоты. При потреблении значительных количеств алкоголя (40-60 г в день на протяжении нескольких дней, или больших разовых доз) возрастает доля карбонгидрат-дефицитного трансферрина (CDT) –изоформ с двумя, одним остатком или полностью десиализированный трансферрин (0-форма). В норме фракция CDT не превышает 1.3 % – 1.7 %, тогда как при потреблении указанных количеств алкоголя уровень CDT превышает эти границы и может возрастать до 10-15 раз. Выбор данного маркера основан на его диагностической возможности отражать как раннее и скрытое злоупотребление алкоголем, так и обеспечивать мониторинг эффективности проводимой терапии посредством объективного отражения ремиссии или возникновения рецидива.

Цель работы заключалась в установлении диагностической значимости сравнительного определения маркеров хронического употребления алкоголя, методами капиллярного электрофореза и биохимического анализа при обследовании различных групп больных алкоголизмом.

Материалы и методы исследования

Исследование проведено на базе Московского научно-практического центре наркологии ДЗ города Москвы в группе мужчин, которое исключает влияние гендерных различий.

Клиническое исследование выполняли в группе больных состоящей из 250 пациентов в возрасте от 23 до 72 лет с установленным диагнозом хронический алкоголизм. Анализ сыворотки крови на содержание маркера карбогидрат-дефицитного трансферрина проводили в динамике, осуществляя забор венозной крови на 1-ый, 7, 14 и 21-ый день лечения. Контрольную группу составили 1000 здоровых доноров. Комплексная оценка больных хроническим алкоголизмом включали данные, о возраст, поле и длительности заболевания. Анализируемые группы пациентов были однородны по всем перечисленным выше характеристикам.

Для установления диагностической значимости маркеров хронического употребления алкоголем проводили определение в сыворотке крови пациентов изоформ гликозилированного трансферрина (CDT) и биохимические показатели содержания печеночных ферментов аланинаминотрансфераза (ALT), аспартатаминотрансфераза (АST), глутаминаминотранспептидазой (GGТ).

Кровь в количестве 5мл забирали в моноветы. Далее пробирки центрифугировали на центрифуге ELMI СМ-6М (Латвия) 5 мин., при скорости 3 тыс. об. мин. После чего сыворотку делили на аликвоты по 1,5 мл в пробирки eppendorf для определения содержания биохимических маркеров и трансферрина. Определение белка CDT проводили на приборе Minicap (Франция). Для определения биохимических маркеров показания крови ALT, AST и GGT по 1 мл сыворотки закапывали в кюветы биохимического анализатора HORIBA ABX Pentra 400 (Франция). Статистический анализ проводили стандартными методами с помощью пакета WinSTAT 2003.1, интегрированного в Excel. При оценке отношения шансов (OR) и значимости отличий частот по точному тесту Фишера использовали свободно распространяемый пакет программ WinPepi: http://www.brixtonhealth.com/pepi4windows.html

Результаты исследования и их обсуждение

При хроническом злоупотреблении алкоголя гликозилирование трансферрина нарушается, что приводит к изменению процентного соотношения его изоформ в сторону повышения уровня низкосиалированных вариантов, называемых также карбогидрат-дефицитными, или CDT. Патомеханизм повышения уровня CDT в ответ на хроническое злоупотребление алкоголем заключается, главным образом, в том, что этанол и/ или его метаболит – ацетальдегид влияют на синтез цепей N-гликанов в аппарате Гольджи, ингибируя активность галактозилтрансферазы и N-ацетилглюкозаминилтрансферазы и одновременно с этим повышая активность сиалидазы в плазматических мембранах печени. Этанол также вызывает дестабилизацию и снижение концентрации м-РНК ?-2,6-сиалилтрансферазы и снижение синтеза ?-2,6-сиалилтрансферазы, обусловленное снижением активности сиалилтрансферазы, и, как следствие, уменьшение сиалирования молекул трансферрина [3,8,9]. Нами были выполнены исследования, направленные на определение диагностической значимости результатов, полученные двумя независимыми методами при обследовании группы лиц с хронической алкогольной зависимостью. Определения маркера CDTпроводили в образцах крови в 1-й, 7, 14 и 21-й дни лечения. Для анализа на биохимические маркеры ALT, AST и GGT использовали образцы 1-й и 21-й дни. При анализе полученных усредненных результатов были выявлены зависимости, представленные на рис. 1, 2.

Как видно из рис. 1, концентрации CDT составляет в среднем 4,31 % при поступлении пациента, на 7 день лечения она уменьшается до 2,27 %. К 14 дню составляла 1,48 %, к 21 дню лечения 1,14 %. Полученные данные свидетельствуют о том, что при полном отказе от алкоголя у пациента происходит снижение концентрации белка и значение CDT приходит в норму за 2-3 недели.

mjg1.wmf

Рис. 1. Зависимость значений CDT от времени

mjg2.wmf

Рис. 2. Зависимость биохимических показателей от времени

На рис. 2 представлена динамика изменения биохимических маркеров. Концентрация ферментов с течением времени так же уменьшается. Однако, даже через 2-3 недели эти значения не нормализуются и остаются высокими. Полученные данные и их значения не позволяют в эти сроки подтвердить полный отказ пациента от алкоголя. Таким образом, сравнивая в динамике уменьшение числового ряда значений CDT и биохимических показателей, характеризующих содержание ферментов, можно заметить, что данные CDT являются более информативными по сравнению с такими маркерами, как ALT,AST и GGT. В отличие от содержания ферментов повышение гликозилированного трансферрина в наименьшей степени ассоциировано с органическим поражением печени или других органов (как алкогольного, так и неалкогольного генеза) или повышенным синтезом микросомальных ферментов. В отличие от других гликопротеинов, недостаток сиалирования изоформ трансферрина никак не связан с клиренсом печени или почек.

Заключение

Проведены сравнительные исследования маркеров хронического злоупотребления алкоголем характеризующих изменения в содержании ферментов и гликозилированного трансферрина. При этом использовали методы биохимического анализа и капиллярного электрофореза. Установлено, что наиболее важными для диагностики ранних состояний алкоголизма являются данные определения CDT.

Таким образом, маркер CDT является универсальным диагностическим инструментом для реализации профилактической и медико-реабилитационной стратегии при заболеваниях зависимости от алкоголь-содержащих веществ. Ключевой составляющей при использовании маркера CDT является объективизация факта злоупотребления алкоголя методами лабораторной диагностики. Представленный маркер CDT на сегодняшний день является единственным маркером оценки хронической алкогольной нагрузки, имеющий опыт практического использования.

Результаты, полученные на основе анализа данных о пациентах с алкоголизмом, послужат основой для разработки стратегий мониторинга рисков, оптимальных терапевтических и профилактических стратегий, а также поиска новых фармакологических мишеней с применением новых методов диагностики такого социально значимого заболевания, как алкоголизм.


Библиографическая ссылка

Мягкова М.А., Пушкина В.В., Петроченко С.Н., Мягкова М.А., Пушкина В.В., Петроченко С.Н., Морозова В.С. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАРКЕРОВ ХРОНИЧЕСКОГО ЗЛОУПОТРЕБЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ МЕТОДОМ КАПИЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2015. – № 12-9. – С. 1640-1643;
URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=8210 (дата обращения: 29.08.2019).

Источник: applied-research.ru

Где проводится анализ?

Исследование проб проводится в специальных лабораторных условиях: в наркологических клиниках или в платных терапевтических центрах.

Анализ крови на алкоголь определяет количество чистого спирта в крови человека. Подсчет ведется в тысячных долях кровяного объема – промилле. Показатель демонстрирует, какое количество этанола присутствует в литре крови, и определяет количество выпитого спиртного накануне.

Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови
Лаборатория

Как этанол действует на кровь?

Каждый врач во время назначения лабораторного анализа крови обязан предупреждать пациента о том, что не меньше суток до сдачи пробы нельзя употреблять продукты, содержащие спирт. Клинические показатели могут серьезно измениться под воздействием алкоголя.

Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови
Алкоголь в кровяных клетках

Состав крови меняется следующим образом:

  • Увеличивается содержание молочной кислоты.
  • Поднимается процент триглицеридов, что может свидетельствовать о начале развития атеросклероза.
  • Существенно растет содержание мочевой кислоты по сравнению с нормальными параметрами. Врач может расценить такой результат как признак болезни печени и почек;
  • Поднимается число эритроцитов.
  • Увеличивается показатель холестерина.
  • Повышается содержание ферментного вещества гамма-глутамилтранспептидазы. Это указывает на патологии печени.

Если опытный врач обнаружит существенное превышение перечисленных параметров биохимического исследования крови, он может предположить, что пациент перед сдачей крови употреблял спиртное. Однако данные параметры могут быть и признаками начинающихся проблем с жизненно важными органами: почками, сердцем и печенью. Так что для получения достоверных результатов анализов в лабораторию нужно идти в совершенно трезвом виде.

Определение злоупотребления спиртным с помощью CDT

Анализ CDT показывает фракцию трансферрина. Данное вещество представляет собой сывороточную аминокислоту, чья главная функция – транспортировка железа в организме. Этот белок присутствует в крови в качестве изоформы с разным числом прикрепленных продуктов сиаловых кислот. Одна молекула трансферрина содержит до 8 таких кислот.

Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови
Сывороточный трансферрин

Главной формой сывороточного белка в крови считается карбогидрат-тетрасиалотрансферрин. Когда человек употребляет спиртное в больших дозах, процесс гликозилирования трансферрина протекает со сбоями, отчего в крови повышается количество его иных изоформ, содержащих меньшее число продуктов сиаловой кислоты. Они оцениваются в качестве суммарного углеводного дефицитного трансферрина – CDT.

Биохимический анализ крови СДТ показывает высокий уровень дефицитного сывороточного белка, если пациент каждый день употребляет минимум 60 миллилитров этанола (такое количество содержится в одной бутылке вина) на протяжении 14 дней.

Если человек однократно принимает большое количество спиртного, то содержание CDT в сыворотке крови остается неизменным. Время полувыведения данного белка составляет 2 недели. Так что после отказа от спиртного на этот срок вышеуказанный показатель полностью приходит в норму.

Специфика анализа CDT

Анализ крови CDT помогает диагностировать хронический алкоголизм у людей в 90 процентах случаев. При этом чувствительность белка к спирту составляет 70 процентов.

Если анализ крови на алкоголь проводится с применением высокоэффективной хроматографии жидкостного типа, то оно даст максимально точный результат, в отличие от иммунологических методов, с точки зрения чувствительности и специфики анализа. Содержание CDT высчитывается в относительных долях – процентах от общего количества трансферрина. Так что если человек страдает малокровием, это никак не скажется на показателях анализа.

Внимание! Несмотря на высокую результативность анализа CDT для определения алкоголизма, не рекомендуется самостоятельное назначение этого исследования без прохождения других анализов. Стоит учесть, что содержание углеводного дефицитного трасферрина может быть высоким при вынашивании плода, употреблении гормонов, галактоземии.

Цели проведения анализа крови на алкоголь

Лабораторный тест на алкоголь может назначаться для:

  • Выявления хронического алкоголизма;
  • Оценки результативности лечения алкоголизма;
  • Наблюдения абстиненции для определения рецидивов зависимости от спиртного;
  • Дифференциального диагностирования причин патологий печени и неадекватного поведения пациента.
Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови
Алкоголизм

В каких случаях назначают анализ?

Биохимический анализ крови на наличие этанола может быть назначен в случае:

  1. Подозрения на алкогольную зависимость;
  2. Наличия симптомов и изменений анализов крови, ассоциирующихся со злоупотреблением спиртным;
  3. Наблюдения за больными с высоким риском развития алкоголизма.

Расшифровка и причины высокого CDT

Если биохимия показала, что в крови пациента менее 1,2 процента трансферрина, то это значение считается нормальным. Когда процент превышает 2,5, – это патологический показатель.

Среди причин высокого показателя CDT можно отметить:

  • Употребление спиртного в дозе выше 60 миллилитров этанола каждый день на протяжении минимум 14 дней;
  • Врожденные сбои в процессе гликозилирования в сыворотке крови.

Внимание! Есть вероятность получения ложноположительного показателя биохимии крови на СДТ. Это может быть спровоцировано билиарным первичным циррозом, клеточной карциномой печеночных тканей, анемией в тяжелой форме.

Что нужно знать пациентам, сдающим кровь на алкоголь?

Биохимический анализ крови устанавливает количество спирта только в момент забора пробы. Это исследование не показывает, как давно алкоголик употреблял спиртное. Специальная подготовка для этого обследования не нужна. Однако анализ крови на алкоголь часто помогает выявить, был ли человек пьяным в то время, когда сдавал кровь. Один из самых точных методов биохимии – газовая хроматография.

Виды анализов на алкоголь

Газовая хроматография

Во время этого исследования образец крови пациента отправляется в специальную колбочку из стекла, в которой жидкая среда медленно испаряется. В пробирке при этом остается газ, который подвергается исследованию с помощью соответствующего оборудования – хроматографа. В остаточном газе эксперты оценивают наличие этанола. Такой способ предусматривает применение дорогой техники и специальных химических реагентов. Методика хроматографии применяется в каждой лаборатории, обладающей лицензией на такой род деятельности.

Ферментный метод

Ферментная методика не так распространена, как хроматография. В ее основе лежит то, что при поступлении в организм алкоголя увеличивается активность ферментов, отвечающих за его переработку. В организме непьющего пациента этих ферментов нет. Во время выполнения анализа сданная кровь отправляется в колбу и делится на фракции. Пробирка, где находится сыворотка крови, отправляется в специальный анализирующий прибор. Для установления результатов требуется всего несколько минут времени, после чего наличие и количество ферментов в кровяной сыворотке станет известно.

С помощью ферментной методики можно выявить и время, когда употреблялось спиртное, и уровень зависимости пациента от спиртсодержащих напитков.

Нередко анализ ферментов на определение спирта применяется в наркологической терапии с целью мониторинга людей, страдающих алкоголизмом, которые проходят курс лечения. Пациент может отрицать факт приема алкоголя, но анализы не соврут.

Методика Видмарка

Данный вид анализов проводится редко ввиду неточности результатов. Формула, которую предложил Видмарк, не выявляет количество спирта, не всосанного в кровь. Чаще всего этот способ применяется для обследования крови у умерших людей.

Карбогидрат дефицитного трансферрина cdt в сыворотке крови
Исследование проб

Что влияет на показатели анализов?

Иногда в медицинской практике случаются конфликтные ситуации, когда у совершенно трезвого человека выявляют высокий процент этанола в анализах. Это возможно в таких случаях:

  • При неправильном заборе проб. Неопытный лаборант может протереть кожный покров спиртом в том месте, где выполняется укол, чего делать категорически нельзя;
  • В крови диабетиков нередко повышается уровень ацетона, что тоже сказывается на результатах анализа на алкоголь;
  • Употребление медикаментов, содержащих спирт – настоек на травах, сиропов и пр.;
  • Отравление метиловым спиртом.

Как быстро выводится спирт из организма?

Организм каждого человека уникален. Все люди по-разному реагируют на различные дозы употребляемого спиртного, поэтому намеренно снизить его процент в анализах сложно. Кто-то от определенной дозы может попрощаться с жизнью, а кто-то от такого же количества просто слегка опьянеет. Считается, что к смерти может привести доза выше 4 промилле этанола в крови.

На скорость выведения спирта из крови влияет крепость алкогольного напитка. Чем она выше, тем дольше этанол задержится в человеческом организме. Дело в том, что крепкое спиртное медленно всасывается, соответственно, медленно снижается его содержание. Еще на скорость влияет и состояние здоровья пациента: работа легких, печени и выделительной системы.

Источник: LechiSerdce.ru


Leave a Comment

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.